Туберкулез биохимия

by:

Как лечить?

Анализ крови на туберкулез: особенности, виды и расшифровка

Многие интересуются тем, как берется и делается анализ крови на туберкулез. Данная процедура довольно распространена. Это современный ответ прежним типам диагностики заболевания. Но какими бывают анализы крови? Что за особенности они включают в себя? И как гражданин по результатам должен понять, есть ли у него заболевание, или нет? Разобраться во всем этом не так трудно, как кажется. Не нужно иметь медицинское образование, чтобы по готовым результатам сделать вывод. Так какими знаниями должен обладать гражданин в отношении анализов на туберкулез?

Для начала разберем, о какой болезни идет речь? Дело все в том, что туберкулез — это тяжелое хроническое заболевание, крайне опасное и заразное. Передается воздушно-капельным путем или через бытовые приборы. Оно весьма распространено в мире, но на начальных стадиях туберкулез довольно трудно выявить.

Данное заболевание способно поразить все человеческие органы. Поэтому нельзя точно предсказать, каким будет исход. Чтобы вовремя распознать болезнь, требуется провести комплекс исследований. Например, сделать анализ крови на туберкулез.

Самым распространенным типом болезни является тот, что поражает легкие. Именно с ним у многих складывается ассоциация. Довольно часто проявление болезни можно спутать с обычной простудой. Туберкулез сам по себе никак серьезно не проявляется. Особенно на начальных этапах развития.

Типы диагностики заболевания

Многие интересуются, как называется анализ крови на туберкулез. Знать это важно. Ведь при своевременном лечении заболевание отступает, и человек не сталкивается с серьезными негативными последствиями болезни. Важно знать, что на данный момент в мире есть несколько типов диагностики.

Какие именно? Можно выделить следующие:

В некоторых случаях проводится общий анализ крови. Обычно это делается на начальных этапах, чтобы выявить вероятность наличия заболевания. А подтверждение происходит только посредством указанных ранее методов. Сейчас придумали еще один способ, который заменяет анализ крови на туберкулез — диаскинтест. Он не контактирует с кровью, но помогает при этом обнаружить туберкулезную палочку в организме человека. Он имеет ряд своих преимуществ и недостатков. В России был введен в 2016 году.

Теперь немного об анализах крови. Ведь именно они считаются наиболее информативными. Чаще всего под данным термином подразумевают ИФА-исследование. Такой анализ крови на туберкулез позволяет выявить наличие антител к туберкулезным палочкам.

В принципе, не самый худший вариант. Все, что должен сделать пациент, — это сдать кровь на анализ. Обычно берут венозную, она предоставляет более точный результат. К сожалению, сейчас принято считать ИФА не слишком информативным. Ведь по данному исследованию нельзя будет сказать, на какой стадии находится заболевание, если оно имеется. Зато подобная процедура помогает, как уже было сказано, выявить наличие антител к заболеванию в организме.

К счастью, медицина не стоит на месте и существуют иные способы выявления недуга. Причем, связанные с кровью. Какие плюсы и минусы у них есть? Как они проводятся? Каким образом можно понять, что человек болен?

Куда более информативным и эффективным является анализ крови ПЦР на туберкулез. Это современный способ, который позволяет определить наличие туберкулезной палочки. Крайне информативен, если на исследование берется не кровь, а мокрота.

Как правило, ПЦР-диагностика назначается при подозрительных симптомах, которые чем-то напоминают туберкулез. Тем не менее, как говорят врачи, данное исследование в случае с кровью не дает 100% результата. Он возможен только тогда, когда пациент болен туберкулезным сепсисом. В противном случае ПЦР-диагностика крови не имеет высокой результативности.

На что еще следует обратить внимание? Анализ крови при туберкулезе у детей, как правило, не проводится. Чаще всего им назначают так называемую реакцию Манту. Данная технология позволяет с высокой, но не 100% точностью выявить наличие заболевания.

Как проводится анализ? Ребенку подкожным методом вводят специальный препарат. Далее несколько дней нужно наблюдать за местом укола. Если туберкулеза нет, то данная область останется без изменений. Можно заметить лишь небольшую припухлость и изменение цвета кожи — она станет более розовой.

При наличии туберкулеза место укола отекает, опухает, опухоль начинает разрастаться. Иногда может приобретать синюшный цвет. В данной ситуации ребенку повторно назначают Манту. Либо делается анализ крови на туберкулез (ИФА или ПЦР), который подтверждает или опровергает результат пробы.

Манту иногда ошибается

Тем не менее следует обратить внимание на то, что реакция Манту — это далеко не самый лучший способ диагностики туберкулеза в организме. Дело все в том, что данный анализ нередко ошибается.

Как еще можно интерпретировать полученный анализ? Расшифровка положительной реакции Манту проста. Она может наблюдаться при:

  • обострении обычных хронических заболеваний;
  • астме;
  • аллергии;
  • инфекционных болезнях;
  • ослабленном иммунитете;
  • эпилепсии.
  • Соответственно, даже положительный результат пробы не дает точных указаний на наличие болезни. Поэтому анализ крови на туберкулез вместо Манту оказывается более эффективным и информативным. Нужно исключить все ранее перечисленные варианты развития событий. Только тогда можно будет судить о наличии заболевания.

    Если Манту оказалась положительной, не следует поднимать панику. Уже было сказано, что данный способ диагностики не самый лучший. Нужно сдать анализ крови. При туберкулезе легких (и не только) происходят некоторые изменения в организме. Какие именно?

    Дело все в том, что на начальных стадиях кровь остается без изменений. Поэтому общий или клинический анализ не имеет смысла. В зависимости от «запущенности» болезни, будут меняться те или иные показатели. Общий анализ крови при туберкулезе иногда действительно помогает удостовериться в наличии или отсутствии заболевания.

    Тем не менее только на него полагаться не стоит. Ведь кровь и ее состав меняются, в зависимости от множества факторов. Поэтому рекомендуется либо ИФА-диагностика, либо ПЦР. Но и об общем анализе крови тоже не следует забывать.

    Расшифровка по общему анализу

    На какие показатели нужно обратить внимание, если есть вероятность туберкулезного заражения? При активной стадии заболевания общий анализ крови действительно поможет понять, что в крови находится возбудитель.

    Как именно? Основополагающей является СОЭ. В норме у человека данный показатель будет зависеть от возраста. Следует опираться на следующие данные:

    • дети до 10 лет — до 10 мм/ч;
    • женщины до 50 лет — до 20 мм/ч;
    • женщины после 50 — до 30 мм/ч;
    • мужчины до 50 лет — 15 мм/ч максимум;
    • после 50 — до 20 мм/ч.
    • Тем не менее СОЭ у беременных и больных людей может повышаться. При туберкулезе, как правило, данный показатель возрастает приблизительно до 50 единиц и больше. Поэтому следует обратить внимание на него. Если скорость оседания эритроцитов в крови превосходит значительно норму, можно сделать вывод о высокой вероятности заражения.

      Особенности анализа крови

      Какие особенности нужно учитывать, если решено провести дополнительное исследование на наличие изучаемого заболевания? Анализ крови на туберкулез вместо Манту назначается довольно часто. Но при этом ИФА и ПЦР часто не достаточно для окончательной постановки диагноза. Общий анализ крови тоже не полностью показывает картину происходящего в организме.

      Следует обратить внимание на то, что врач при подозрениях на наличие туберкулезной палочки в организме назначает биохимический анализ крови. Также можно сделать отдельно исследование на наличие белка. Это позволит удостовериться в результатах.

      Если туберкулез есть, но только в неактивной форме, то показатель белка окажется в переделах нормы. Острая форма заболевания повышает холестерин, мочевину и лизоцим. При этом альбумин окажется пониженным.

      Заболевание, которое поражает печень, увеличивает такие показатели, как АСТ, АЛТ и билирубин. Все это выявляется по анализу крови, в то время как реакция Манту не дает подобной информации. Этот факт нужно учитывать.

      Теперь понятно, что если есть какие-то опасения по поводу наличия изучаемого заболевания в организме, можно сдать анализ крови на туберкулез. Также дополнительно назначается биохимия и общее исследование. Все это помогает комплексно оценить ситуацию и сделать вывод о наличии болезни в организме.

      Тем не менее сейчас многие говорят о новом типе диагностики туберкулеза, который позволяет не контактировать реагенту с кровью. Речь идет об упомянутом ранее диаскинтесте. Это замена Манту. Стоит ли верить данному исследованию? Какие плюсы и минусы у него есть?

      Данный способ диагностики позволяет не контактировать с кровью — это уже было подчеркнуто неоднократно. А значит, при ослабленном организме нет вероятности заражения болезнью. Для пациента диаскинтест напоминает Манту. Исследование требуется проводить ежегодно. Обычно раз в 12 месяцев для людей от 8 до 17 лет.

      Правда, многие указывают на то, что данный тип проверки организма на наличие туберкулеза не отличается точностью. Все это из-за того, что, как и при реакции Манту, некоторые факторы могут дать ложноположительный результат. И человеку назначат либо повторное исследование, либо анализ крови на туберкулез.

      Теперь понятно, как можно выявить наличие изучаемого заболевания при помощи тех или иных анализов. QuantiFERON-TB Gold и IGRA — это редко встречающиеся на практике методики исследования крови. Собой представляют скриннинги, которые указывают на содержание антител и наличие болезни. В России практически не применяются.

      Можно заметить, что даже общий и биохимический анализы крови помогут выявить туберкулез в том или ином случае. Достаточно обратить внимание на некоторые показатели. Они будут нарушены. СОЭ при туберкулезе обязательно повышается. Вообще, только врач может на основании нескольких исследований сделать точное заключение. Для подтверждения диагноза можно брать на анализ не кровь, а мокроту.

      fb.ru

      Из многих биохимических тестов, широко используемых в настоящее время в клинической практике, определенное значение имеет изучение состава белков крови, которые играют весьма важную роль в физиологических функциях и гомеостазе организма, в состоянии иммунитета, развитии и течении воспалительных реакций и т. д.

      Сдвиги в белковом составе крови при туберкулезе зависят не только от его формы, но главным образом от фазы процесса, его осложнений и различных сопутствующих заболеваний. У больных с неактивными специфическими изменениями в легких и других органах в сыворотке крови определяется нормальное содержание общего белка, фибриногена, белковых фракций и гликопротеидов; отсутствует С-реактивный белок, не увеличена РОЭ, нет отклонений в коагуляционных пробах и т. д. При свежих, особенно остро протекающих, формах болезни, а также при обострении и прогрессировании хронического процесса наблюдается диспротеинемия, а иногда и гипопротеинемия, т. е. наступают количественные и качественные изменения в составе белков как проявление неспецифической гуморальной реакции на патологические сдвиги в организме. В таких случаях нарастает РОЭ, изменяются коагуляционные пробы, появляется С-реактивный белок, повышается уровень фибриногена, нарушается количественное соотношение белковых фракций и содержание белково-углеводных соединений (глико- и мукопротеидов, серомукоидов) в сыворотке и плазме крови.

      Как показывают многочисленные исследования, в частности проведенные в клинике туберкулеза ЦОЛИУ врачей И. В. Алфимовой (1965), К. В. Бережковой (1955), Л. Н. Бринбауэр (1965), Р. А. Иоффе (1962) и др., эти сдвиги характеризуются уменьшением содержания альбуминов и повышением уровня глобулинов и гликопротеидов. При инфильтративной фазе процесса заметно увеличивается концентрация фракции глобулинов и гликопротеидов, а при фиброзно-кавернозном туберкулезе и эмпиеме плевры значительно нарастает, кроме того, уровень их фракции. При этих формах болезни снижается также концентрация липопротеидов и несколько повышается уровень Р-фракций. Чем острее и неблагоприятнее протекает туберкулез и чем тяжелее его осложнения, например амилоидозом, тем больше содержится в крови связанных с белками гек-соз, гексозаминов, серомукоидов и сиаловой кислоты. По мере затихания болезни протеинограмма постепенно приходит к норме, но медленнее, чем ускоренная РОЭ. Вместе с тем содержание глобулинов и гликопротеидов оказывается нередко повышенным в ранней фазе процесса. По данным Р. А. Иоффе (1962), из 119 больных различными формами туберкулеза легких у 65 при нормальных показателях РОЭ отмечались те или иные сдвиги в белковых фракциях сыворотки крови, главным образом в содержани альбуминов, глобулинов.

      В связи с этим исследование белкового профиля важно при определении активности и динамики процесса, а также при оценке эффективности лечения. Оно играет меньшую роль в дифференциальной диагностике туберкулеза и других воспалительных или опухолевых заболеваниях легких, так как и при них имеют место подобные нарушепия белкового состава крови. Тем не менее при некоторых состояниях этот биохимический показатель приобретает известное значение, например в тех случаях, когда туберкулез напоминает по своей клинико-рентгенологической картине рак, саркоидоз, легочные проявления коллагенозов, при которых диспро-теинемия часто имеет более выраженный и своеобразный характер.

      Тот же вывод следует сделать, оценивая результаты исследования содержания фибриногена в крови при различных заболеваниях органов дыхания. Как показали наблюдения Л. Н. Бирнбауэр (1965), проведенные в нашей клинике, его уровень обычно находится в пределах нормы при очаговом, инфильтративном и диссеминированном туберкулезе в фазе рассасывания и уплотнения или при стабильных туберкуломах. Он повышается при выраженных инфильтративных и деструктивных изменениях. Концентрация фибриногена, как и других белковых компонентов, повышается при раке, абсцессе, злокачественных опухолях средостения, но не претерпевает существенных сдвигов при саркоидозе, гамартохондроме, ненагноившихся кистах и т. д. Учет этих данных, конечно, в сочетании с основпыми клинико-рентгенологическими признаками важен при дифференциальной диагностике указанных заболеваний.

      Из других показателей белкового обмена заслуживают внимания данные о составе свободных и, в частности, незаменимых аминокислот в сыворотке кроЕи. При активных формах туберкулеза легких часто уменьшается содержание цистеина, цистина, орнитина, валина, аргинина, гистидина и т. д. Эти сдвиги нарастают по мере утяжеления болезни и, наоборот, устраняются при ее затихании.

      В то же время при изучении экскреции аминокислот с мочой у больных с эволютивными формами туберкулеза отмечается обратное соотношение: повышается суммарное содержание аминокислот и отдельных из заменимых (аспарагиновая кислота, серии, цистеин) и незаменимых ингредиентов (гистидин, аланин, тирозин, треонин, глутаминовая кислота и др.). Эти показатели в той или иной степени также нормализуются при благоприятном течении болезни. Характерно, что у больных саркоидозом органов дыхания даже при II и III стадиях, как показали наши наблюдения, существенные отклонения в аминокислотном составе крови не отмечаются.

      Приведенные данные свидетельствуют, таким образом, о целесообразности изучения состояния белкового обмена при туберкулезе, что важно как в прогностическом, так и в диагностическом отношении.

      Существенную роль в оценке функционального состояния и органических повреждений печени при туберкулезе и его осложнениях приобретают, как указывалось раньше, биохимические тесты: определение содержания в крови билирубина, альдолазы и активности аминотрансфераз, выделения конго красного, бромсульфалеина, исследование уровня сахара в крови после нагрузки глюкозой или галактозой.

      Для выявления нарушений функции почек важно определение содержания остаточного азота в крови, мочевины, креатинина, индикана и т. д. О состоянии коры надпочечников можно судить по содержанию 17-кетостероидов в моче, а также свободных и белковосвязанных 11-оксикортикостероидов. Ценными являются сведения о нарушении обмена некоторых витаминов (тиамин, рибофлавин, пиридоксин, никотиновая кислота и др.), на уровень которых влияют не только туберкулезная интоксикация, но и различные химиопрепараты.

      Оглавление темы «Диагностика туберкулеза. Классификация туберкулеза.»:

      meduniver.com

      Блокнот фтизиатра – туберкулез

      Все, что Вы хотите знать о туберкулезе

      Анализы крови и мочи при туберкулезе

      Элементы красной крови, как правило, мало изменяются при туберкулезе. Только после острой потери крови из легких или кишечника может наблюдаться анемия. Небольшое снижение уровня гемоглобина можно видеть при хронических формах фиброзно-кавернозного туберкулеза легких.

      Одним из показателей активности туберкулезного процесса является СОЭ (скорость оседания эритроцитов). Ускоренная СОЭ коррелирует не только с активностью и протяженностью текущего свежего процесса, но также с обострением хронических, особенно фиброзно-кавернозных, процессов.

      Элементы лейкоцитарной фракции крови реагируют на туберкулезный процесс более активно.

      Условно различают три фазы изменений лейкоцитарной фракции крови, связанные с характером поражений при туберкулезе легких.

      1. Нейтрофильная фаза борьбы. В крови доля нейтрофилов увеличена, в результате имеется сдвиг формулы влево. Эозинофилы отсутствуют, количество лимфоцитов и моноцитов уменьшено.

      2. Моноцитарная фаза — преодоление инфекции. В крови количество лимфоцитов увеличено, формула крови сдвинута влево, число нейтрофилов снижено, выявляются одиночные эозинофилы.

      3. Фаза восстановления. Доля лимфоцитов и эозинофилов увеличена. Показатели крови постепенно нормализуются.

      Такое разделение на фазы отражает только общую реакцию крови.

      Ядерный сдвиг нейтрофилов при туберкулезе

      Помимо количественной, группа нейтрофилов имеет качественную характеристику, которая значительно тоньше и раньше свидетельствует о различных патологических процессах.

      Туберкулез взрослых обычно вторичный процесс, чаще всего он вызывает в крови только увеличение палочкоядерных нейтрофилов. При выраженных инфильтративно-пневмонических формах и явлениях распада легочной ткани сдвиг нейтрофилов влево выявляется довольно отчетливо и может доходить до 20-30% палочкоядерных.

      Легочный же инфильтрат не имеет распада, и очаговые формы туберкулеза в период их первого выявления или обострения при субфебрильной температуре и маловыраженных функциональных расстройствах дают менее выраженный сдвиг. При этом остальные элементы гемограммы могут совершенно не выявлять отклонений от нормы. Поэтому тщательное определение ядерного сдвига получает при туберкулезе особое значение.

      Учение о ядерном сдвиге нейтрофилов было выдвинуто Арнетом (1905 г.) на основании изучения крови при различных инфекциях, в том числе и при туберкулезе.

      Производя сложные подсчеты с многочисленными зарисовками, Арнет подметил некоторую закономерность в конфигурации ядер нейтрофилов.

      В крови здорового человека содержатся:

    • 5% нейтрофилов с неразведенными перетяжками, несегментированным ядром (I класс);
    • 35% нейтрофилов с двумя сегментами, соединенными нитевидной перетяжкой (II класс);
    • 41% нейтрофилов с тремя сегментами (III класс);
    • 17% нейтрофилов с четырьмя сегментами (IV класс);
    • 2% нейтрофилов с пятью сегментами (V класс).
    • Помимо сегментации ядра, Арнет учитывал и его форму. Так, для первого класса он выделил несколько подклассов по степени вдавления несегментированного ядра. Остальные классы разбиты на подклассы в зависимости от формы сегментов.

      При инфекциях пропорционально их тяжести число многосегментированных форм уменьшается, число малосегментированных (2-3 сегмента) и несегментированных (являющихся относительно молодыми клетками) растет.

      В схеме Арнета число несегментированных нейтрофилов I класса представлено слева; справа же располагается число клеток II класса, затем III класса и т. д. Следовательно, при увеличении несегментированных и малосегментированных форм возрастает число клеток левой стороны схемы и происходит «сдвиг влево».

      Экскреция мочи у больных туберкулезом практически нормальная. Патологические изменения в моче могут быть при поражении туберкулезом почек или мочевыводящих путей.

      У больных с хроническими формами туберкулеза легких или костей могут быть выявлены признаки амилоидоза.

      ftiza.su

      Расшифровка анализа крови на туберкулез ребенку

      Среди всех инфекционных заболеваний туберкулез занимает важное место. Частота развития его в настоящее время неуклонно растет. При этом не всегда больной человек может догадываться о том, что у него имеется данная патология. Некоторые сознательно могут этого не сказать, из-за чего повышается риск заболевания у здоровых людей, и в первую очередь — детей.

      Диагностика туберкулеза у детей: анализ крови

      Эта процедура в детском возрасте крайне важна, так как при несвоевременно выявленном процессе и поставленном диагнозе возможно как дальнейшее развитие процесса с вовлечением иных органов и систем, не считая дыхательной, так и протекание его в хронической, длительной форме.

      Диагностика туберкулеза у детей, как и туберкулеза у взрослых, показывает, что заболевание может протекать как с выделением бактерий, так и без него. Люди, не выделяющие микобактерию туберкулеза — основной возбудитель заболевания, менее опасны для общества, нежели выделители, однако своевременная диагностика заболевания должна быть превыше всего.

      Как известно, заболевание передается воздушно-капельным путем, обычно при помощи аэрозоля, выделяющегося из наших дыхательных путей при кашле. Попадая в дыхательные пути, микобактерии оседают на слизистых оболочках, попадают через них в лимфатическую систему и с током лимфы, а иногда и крови разносятся по организму. Таким образом, бактерия заносится и в легкие, где протекает основной процесс. Подобное распространение не может остаться не замеченным системой иммунитета. На такое внедрение она начинает реагировать выработкой тех или иных веществ, попутно изменяя и данные многих анализов и исследований. В первую очередь изменяется клеточный состав крови. Отмечается увеличение одних и снижение других показателей.

      Симптомы туберкулеза

      В первую очередь следует обратить внимание на общий анализ крови на туберкулез. Данный метод относится к скрининговым и позволяет определить состояние организма у довольно большого количества людей за короткий промежуток времени. Если в организме имеется какой-либо патологический процесс, то он обязательно найдет свое отражение в общем анализе крови.

      Обычно у детей туберкулез протекает без каких-либо специфических проявлений, как любая другая бактериальная инфекция. Если же анализ крови на туберкулез и его показатели изменяются, то картина крови становится похожей на таковую у взрослого человека.

    • Эритроциты. Данные клетки крови отвечают за перенос кислорода к тканям. Обычно при легких формах туберкулеза их количество ничем не отличается от нормального. Если же имеет место казеозная пневмония, какой-либо распад (деструктивный туберкулез) или хронический процесс (у детей практически не встречается), то чаще всего в анализе крови можно увидеть анемию. Анемия развивается при поражении туберкулезом пищеварительного тракта. Зачастую увеличивается и количество незрелых эритроцитов — ретикулоцитов (в норме их количество составляет не более 0,5 промилле, а при туберкулезе оно возрастает до 1%).
    • Чаще всего при туберкулезе изменяется лейкограмма. Обычно наблюдается лейкоцитоз со сдвигом лейкоцитарной формулы влево. В формуле наблюдается увеличение количества сегментоядерных нейтрофилов. Реже заболевание протекает с развитием лейкопении (по данным исследований, она наблюдалась у 20% больных людей с ограниченными или легкими формами инфекционного процесса и у 12-14% с процессами распада в легких). Параллельно с этим наблюдается уменьшение количества лимфоцитов, обычно до 20%, и моноцитоз более 18-19% (данное явление чаще всего наблюдается при диссеминации процесса).
    • Что касается эозинофильного ростка, то изменения в нем могут идти в обе стороны. Увеличение количества эозинофилов наблюдается при начальных стадиях развития процесса, при рассасывании образованных инфильтратов и выпота. Уменьшение же количества эозинофилов — вплоть до полного их отсутствия — может наблюдаться при тяжелом течении заболевания или массивном процессе с распадом.
    • В крови практически всегда наблюдается увеличение количества базофилов.
    • Кроме того, по показателям гемограммы можно судить о стадии развития туберкулезного процесса.

    • В фазе инфильтрации наблюдается относительный лейкоцитоз за счет увеличения нейтрофилов, нередко с патологической зернистостью. Увеличивается скорость оседания эритроцитов. Может наблюдаться увеличение количества тромбоцитов.
    • В фазе распада характерен лейкоцитоз с нейтрофилезом, снижение количества эозинофилов и лимфоцитов, появление молодых форм нейтрофилов.
    • Фаза диссеминации протекает с абсолютным моноцитозом.
    • В фазе рассасывания можно наблюдать восстановление количества эозинофилов и лимфоцитов.
    • На конечной стадии — в фазе уплотнения — изменений в гемограмме может и не быть.
    • Современный метод диагностики

      С недавнего времени стал известен еще один способ диагностики активного туберкулеза у детей — ТАМ-ТВ. Данная реакция дословно расшифровывается как определение Т-клеточного маркера туберкулеза. Суть ее такова: при туберкулезе часто наблюдается отсутствие одного из кластеров дифференциации — CD 27. Данный кластер локализуется на поверхности Т-лимфоцитов и участвует в распознании клеток иными клетками. В результате последующего окрашивания цитокинов и последующей цитометрии удается выявить наличие либо отсутствие кластера и судить о присутствии заболевания.

      Метод появился недавно — осенью 2014 года, но уже успел зарекомендовать себя как высокочувствительный способ диагностики туберкулеза даже при отрицательных результатах исследования мокроты. Кроме того, данный метод позволяет провести экспресс-диагностику даже у тех детей, у которых не удалось взять мокроту на исследование.

      Реакция Манту на туберкулез

      Долгое время для определения наличия микобактерии туберкулеза у детей использовали реакцию Манту. Суть ее сводилась к следующему: подкожно ребенку вводили туберкулин — один из антигенов микобактерии туберкулеза (для реакции использовался туберкулин родственной бактерии — Micobacterium Bovis). По размерам получившейся папулы судили о реакции иммунитета:

      1. Если папула не превышала 5-16 мм, то реакция считалась нормальной.
      2. При отсутствии папулы можно было сделать 2 вывода: либо микобактерии в организме нет, либо иммунитет настолько ослаблен, что не может прореагировать на вводимый туберкулин, и требуется повторная диагностика параллельно с определением наличия иммунодефицита.
      3. Если папула была больше нормы, это говорило о том, что в организме уже есть клетки, способные распознать антигены микобактерии, и у ребенка, возможно, был контакт с носителем туберкулеза.

      Однако (в силу невысокой надежности метода и частых случаев неправильной интерпретации результатов реакции Манту) ПЦР — полимеразная цепная реакция — вместо этого стала иметь больший приоритет. Данный метод является более специфичным при диагностике туберкулеза различной локализации и позволяет получать более достоверные результаты.

      Для исследования меразной реакции можно использовать любые биологические жидкости (в частности, мокроту, кровь, мочу, спинномозговую жидкость и т.д.).

      Обычно туберкулез распространяется по организму по лимфатическим сосудам (лимфогенный тип распространения). В крови он появляется чаще всего при диссеминации его по организму. Кроме того, появление микобактерий в крови может свидетельствовать о наличии распада в легком с вовлечением сосудов. При этом микобактерия попадает в общий кровоток и часто служит причиной поражения и других органов.

      Чаще всего для постановки диагноза туберкулеза достаточно выявления в исследуемом материале не менее 10 микроорганизмов (однако не все микобактерии отвечают за развитие туберкулеза, т.е. не являются патогенными).

      Для того чтобы правильно провести данное исследование, следует соблюдать некоторые меры. В первую очередь забор биологического материала должен проводиться в стерильных условиях, чтобы избежать возможности попадания других микроорганизмов и неправильной интерпретации анализа. Особое внимание следует уделить личной безопасности, так как высок риск попадания забранного биоматериала на свое тело (особенно если есть ранки на руках, заусенцы) или в дыхательные пути, что существенно повышает риск заражения.

      Забранная кровь помещается в пробирку с предварительно добавленным туда ЭДТА (вещество, препятствующее преждевременному сворачиванию крови и образованию кровяного сгустка). Это необходимо для нормального определения компонентов крови, для лучшей визуализации микобактерий. После забора крови ее желательно не встряхивать, так как это вызывает повреждение эритроцитов.

      Полученную кровь центрифугируют, чтобы отделить клеточный осадок от плазмы. Данный осадок после изучается под микроскопом. Если в полученном анализе удается визуально определить наличие микобактерий, необходимость в проведении ПЦР уменьшается, однако провести ее все же следует.

      После этого к полученному осадку добавляют некоторые ферменты, в частности, транскриптазу. В определенных условиях (необходима температура окружающей среды не менее 38°) происходит реакция достраивания цепей ДНК, в результате чего в растворе образуется несколько фрагментированных участков генетического материала. По наличию их и их количества судят о присутствии заболевания.

      Иногда результат может оказываться ложным. О ложноотрицательном результате можно говорить в том случае, когда анализ для исследования был взят неправильно либо не были соблюдены необходимые условия и меры предосторожности для данной операции. Ложноположительный результат обычно выявляется, когда были загрязнены приборы и посуда для взятия анализа (шприцы, иглы, пробирки).

      Еще один вид исследования заболевания

      Другим не менее важным методом постановки диагноза туберкулеза является иммунограмма.

      Данный анализ позволяет выявить наличие антител и клеток иммунитета в организме и по их титру определить, болел ли человек туберкулезом ранее. У детей иммунограмма не всегда дает правильные результаты, так как детский иммунитет несовершенен, и некоторые вещества, вырабатываемые клетками, могут либо отсутствовать, либо не вырабатываться должным образом. Существенную роль играет и наличие иммунодефицита.

      За развитие противотуберкулезного иммунитета отвечают преимущественно клетки (как было сказано выше — Т-лимфоциты). Так как иммунитет относительный, всегда существует риск повторного развития заболевания, несмотря на то, что оно уже было перенесено и пролечено ранее. Помимо этого туберкулез предрасполагает к развитию вторичного иммунодефицита, что неблагоприятно сказывается на здоровье ребенка (возрастает риск повторного заражения в ближайшее время после перенесенного лечения). При этом повторное развитие заболевания обычно протекает быстрее и тяжелее, часто может сопровождаться деструкцией каверн и массивным бактериовыделением.

      Диагностика туберкулеза в детском возрасте занимает важное место среди иных заболеваний. Стертость клиники, недостаточные изменения в анализах крови способствуют неправильной и несвоевременной интерпретации полученных данных. Из-за этого значительно увеличивается частота развития детского туберкулеза, сопровождающаяся и ростом инвалидности у детей. Для того чтобы предотвратить это, следует больше времени и средств уделять созданию и совершенствованию анализов, позволяющих установить диагноз в кратчайшие сроки. Приоритет лучше отдать экспресс-методам, сочетающим в себе черты бактериологических и серологических исследований.

      101analiz.ru

      Найдены новые потенциальные препараты от туберкулеза

      Рис. 1. Сравнение последовательности аминокислот в человеческой и туберкулезной ЛРСазе. Красной рамкой обведены аминокислоты активного центра. Синее заполнение указывает на полное совпадение, голубое — частичное совпадение (близкие по структуре аминокислоты), красное — несовпадение. Рисунок из обсуждаемой статьи в Bioorganic & Medicinal Chemistry

      Коллаборация украинских и канадских химиков опубликовала две работы, в которых предлагаются принципиально новые потенциальные лекарства от туберкулеза, направленные на селективную деактивацию фермента лейцил-тРНК-синтетазы (ЛРСазы) туберкулезной палочки Mycobacterium tuberculosis.

      Несмотря на успехи современной медицины, туберкулез остается одним из смертоносных заболеваний. Например, только в 2014 году в мире от туберкулеза умерли полтора миллиона человек, главным образом в развивающихся странах. Но и в развитых странах проблему еще рано считать решенной, особенно в связи с появлением бактерий, устойчивых к известным антибиотикам. И это значит, что «гонку вооружений» с микробами останавливать нельзя ни в коем случае.

      Чтобы находить новые лекарства от бактериальных заболеваний, следует сначала найти подходящую мишень — например, какой-либо необходимый для жизни белок-фермент, который будет сильно различаться в патогенных бактериях и в человеке и который можно химически заблокировать, не дать выполнять биохимическую функцию. Тогда можно надеяться, что с большой вероятностью молекула, блокирующая бактериальный белок, не будет блокировать человеческий аналог.

      В середине 2000-х годов был предложен новый класс мишеней для блокировки — аминоацил-тРНК-синтетазы (АРСазы). Иначе говоря, было обнаружено, что некоторые бактериальные (прокариотные) АРСазы зачастую довольно сильно отличаются от эукариотных, и, в частности, человеческих, аналогов.

      АРСаза — фермент-синтетаза, катализирующий образование связки аминокислоты с тРНК перед встраиванием последней в синтезируемый белок. АРСазы обеспечивают правильность происходящего в дальнейшем считывания генетической информации с мРНК при синтезе белков на рибосомах. Для каждой аминокислоты существует своя аминоацил-тРНК-синтетаза.

      К туберкулезу искатели антибиотиков-ингибиторов АРСазы до сих пор не подобрались во многом потому, что не были получены кристаллические трехмерные структуры этих ферментов, то есть было не совсем понятно, по каким признакам определять потенциальные лекарства. Однако первичная структура (последовательность аминокислот в белке) у некоторых туберкулезных АРСаз, в частности у лейцил-тРНК-синтетазы (ЛРСаза) была известна, также было известно, какие именно аминокислоты находятся в активном центре. Ученые из Института молекулярной биологии и генетики УАН (Киев, Украина) и Otava Ltd. (Вон, Онтарио, Канада) решили использовать имеющуюся информацию довольно оригинальным образом.

      Трехмерная структура и точное строение активного центра были известны у другой бактериальной ЛРСазы, принадлежащей грамотрицательной бактерии Thermus thermophilus. Аминокислотные последовательности ЛРСаз Mycobacterium tuberculosis и T. thermophilus имеют всего лишь 37-процентное сходство, однако непосредственно в активном центре их сходство — 95%, в то время как с аминокислотными последовательностями активного центра человеческой ЛРСазы сходство минимально (рис. 1).

      Таким образом, используя структуру ЛРСазы T. thermophilus как шаблон, исследователи построили модель ЛРСазы M. tuberculosis. Теперь в бой вступила хемоинформатика. Ученые взяли базу из 100 000 разнообразных маленьких молекул и протестировали их виртуально на предмет взаимодействия с активным центром модели несколькими алгоритмами, часть которых разработали они сами. Это дало возможность сократить список кандидатов в ингибиторы до 270. Эти 270 кандидатов были протестированы экспериментально на их способность блокировать ЛРСазу M. tuberculosis. Тесты обнаружили, что сильными ингибирующими свойствами (IC50 < 50 мкмоль) обладают 6 молекул, которые принадлежат к двум различным структурным классам (рис. 2).

      Рис. 2. Представители двух обнаруженных классов молекул, ингибирующих ЛРСазу M. tuberculosis. Молекула 1: <[4-(4-Bromo-phenyl)-thiazol-2-yl]hydrazonomethyl>-2-methoxy-6-nitro-phenol. Молекула 2: 5-(2-Hydroxy-5-methylphenylamino)-6-methyl-2H-[1,2,4]triazin-3-one. Рисунок из обсуждаемой статьи в Bioorganic & Medicinal Chemistry

      IC50 (концентрация полумаксимального ингибирования) — показатель эффективности ингибитора, количественный индикатор, который показывает, какова должна быть концентрация ингибитора, чтобы замедлить биологический процесс в условиях максимальной скорости на 50%.

      Рис. 3. Компьютерная модель активного центра ЛРСазы M. tuberculosis, связанного с молекулой 1. Водородные связи показаны зеленым точечным пунктиром. Также молекулы создают гидрофобные и другие взаимодействия (на рисунке не показаны). Рисунок из обсуждаемой статьи в Bioorganic & Medicinal Chemistry

      Рис. 4. Компьютерная модель активного центра ЛРСазы M. tuberculosis, связанного с молекулой 2. Рисунок из обсуждаемой статьи в Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry

      На рис. 3 и 4 показаны компьютерные модели молекул 1 и 2, встроенных в активный центр ЛРСазы M. tuberculosis. С помощью этих моделей можно изучить механизм ингибирования — понять, как именно структурные детали молекул взаимодействуют с аминокислотами патогенного фермента. В число таких взаимодействий входят водородные связи, гидрофобные и другие слабые (но в совокупности достаточно сильные) взаимодействия.

      На основе полученных знаний о структуре молекул можно эту структуру оптимизировать так, чтобы молекулы еще крепче связывались с активным центром туберкулезной ЛРСазы. Используя эти данные, были синтезированы 26 аналогов молекулы 1 и 62 аналога молекулы 2. Среди аналогов молекулы 1 были найдены 6 высокоактивных молекул с IC50 < 20 мкмоль, из них самый низкий IC50 (6 мкмоль) — у самой молекулы 1. Среди аналогов молекулы 2 были найдены две высокоактивные молекулы (у обеих IC50 в районе 7,5 мкмоль).

      Все активные молекулы были протестированы на предмет ингибирования человеческой ЛРСазы — и во всех случаях их активность к патогенному белку была как минимум в 10 раз выше. В случае наиболее активной молекулы 1 было продемонстрированно, что она способна проникать через мембрану бактерий M. tuberculosis и предотвращать их рост при IC50 = 10,01 мкмоль и IC90 = 13,53 мкмоль.

      Авторы пришли к заключению, что найденные молекулы являются хорошими кандидатами на роль антитуберкулезных антибиотиков. Конечно, отсюда до лекарств путь еще очень далек, как по времени так и по деньгам.

      1) Olga I. Gudzera, Andriy G. Golub, Volodymyr G. Bdzhola, Galyna P. Volynets, Sergiy S. Lukashov, Oksana P. Kovalenko, Ivan A. Kriklivyi, Anna D. Yaremchuk, Sergiy A. Starosyla, Sergiy M. Yarmoluk, Michail A. Tukalo. Discovery of potent anti-tuberculosis agents targeting leucyl-tRNA synthetase // Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2016. V. 24. P. 1023–1031.

      elementy.ru

      Туберкулез резистентный: лечение

      Штаммы Mycobacterium tuberculosis , устойчивые к тому или иному препарату, появляются в результате точечных мутаций в геноме бактериальной клетки. Вероятность каждой из мутаций мала; вероятность того, что одновременно произойдут две мутации, еще меньше, так как представляет собой произведение вероятностей каждой из мутаций.

      Поскольку к препаратам первого ряда перекрестной устойчивости не бывает, риск возникновения устойчивости сразу к двум из них чрезвычайно мал. Резистентный туберкулез всегда возникает в результате монотерапии. Это происходит, когда больной (по вине врача или своей собственной) принимает только один препарат, активный в отношении данного штамма Mycobacterium tuberculosis .

      Различают первично-резистентный и вторично-резистентный туберкулез. О первично-резистентном туберкулезе говорят тогда, когда устойчивый штамм обнаруживают у больного, ранее не принимавшего противотуберкулезных средств; о вторично-резистентном — когда устойчивость появляется в ходе неправильно спланированного курса противотуберкулезной терапии. В Европе и Северной Америке первично-резистентный туберкулез редок, чаще всего наблюдается устойчивость к изониазиду .

      Наибольшего внимания заслуживает полирезистентный туберкулез, когда штамм возбудителя устойчив сразу к нескольким препаратам, в частности к изониазиду и рифампицину .

      Возникновение вторично-резистентного туберкулеза можно предотвратить при помощи надлежащего лечения — необходимо использовать по меньшей мере два препарата, к которым чувствителен данный штамм (на первом этапе обычно назначают четыре препарата), и убедиться, что больной полностью закончил прописанный курс лечения.

      При первично-резистентном туберкулезе с умеренной устойчивостью микобактерий к изониазиду хороший эффект дает стандартный шестимесячный курс лечения ( табл. 171.2 ), но все же его рекомендуется продлить до 9 мес и в течение всего этого срока давать этамбутол . При устойчивости микобактерий к изониазиду последний можно отменить.

      Сложнее всего лечить полирезистентный туберкулез, поскольку при нем нередко наблюдается устойчивость возбудителей не только к изониазиду и рифампицину , но и к другим препаратам первого ряда . Для штаммов, устойчивых к изониазиду и рифампицину , годится комбинация этамбутола , пиразинамида и стрептомицина; для штаммов, устойчивых к изониазиду , рифампицину и стрептомицину , — комбинация этамбутола , пиразинамида и другого препарата для парентерального введения, например амикацина . Лечение проводят 12-18 мес, причем с момента появления отрицательных результатов посева мокроты должно пройти не менее 9 мес. Многие специалисты рекомендуют включать в эту схему офлоксацин . Если штамм устойчив ко всем препаратам первого ряда, назначают комбинацию из четырех препаратов. Три из них выбирают из следующего перечня: этионамид , циклосерин , аминосалициловая кислота и офлоксацин , а четвертый — из амикацина , канамицина и капреомицина ( табл. 171.2 ). Оптимальный срок лечения полирезистентного туберкулеза не установлен, обычно — до 24 мес. Поскольку лечение этой формы туберкулеза осложнено не только медицинскими, но и социальными проблемами, его должны проводить фтизиатры совместно с работниками противотуберкулезных служб.

      При очаговом поражении и достаточных функциональных резервах легких можно прибегнуть к лобэктомии или пневмонэктомии.

      humbio.ru

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *