Гепатит и антигенная структура

by:

Как лечить?

Вирус, строение вируса, вирусные антигены.

Вирус (от лат. virus — яд) — простейшая форма жизни, микроскопическая частица, представляющая собой молекулы нуклеиновых кислот (ДНК или РНК, некоторые, например, мимивирусы, имеют оба типа молекул), заключённые в белковую оболочку и способные инфицировать живые организмы.

От других инфекционных агентов вирусы отличает капсид (белковая оболочка). Вирусы, за редким исключением, содержат только один тип нуклеиновой кислоты: либо ДНК, либо РНК. Ранее к вирусам также ошибочно относили прионы, однако впоследствии оказалось, что эти возбудители представляют собой особые белки и не содержат нуклеиновых кислот.

Вирусы являются облигатными паразитами, так как вирусы не способны размножаться вне клетки. Вне клетки вирусные частицы ведут себя как химические вещества. В настоящее время известны вирусы, размножающиеся в клетках растений, животных, грибов и бактерий (последних обычно называют бактериофагами). Обнаружены также вирусы, поражающие другие вирусы (вирусы-сателлиты).

Размеры вирусов колеблются от 20 до 300 нм. В среднем они в 50 раз меньше бактерий. Их нельзя увидеть в световой микроскоп, так как их длины меньше длины световой волны.

Вирусы состоят из различных компонентов:

  • сердцевина / генетический материал (ДНК или РНК).
  • белковая оболочка, которую называют капсидом.
  • дополнительная липопротеидная оболочка.
  • Полностью сформированная инфекционная частица называется вирионом.

    Генетический аппарат вируса несет информацию о нескольких типах белков, которые необходимы для образования нового вируса: ген, кодирующий обратную транскриптазу и другие.

    Капсид — это внешняя оболочка вируса, состоящая из белков. Капсид выполняет несколько функций.

  • Защита генетического материала (ДНК или РНК) вируса от механических и химических повреждений.
  • Определение потенциала к заражению клетки.
  • На начальных стадиях заражения клетки: прикрепление к клеточной мембране, разрыв мембраны и внедрение в клетку генетического материала вируса.
  • Дополнительная липопротеидная оболочка образована из плазматической мембраны клетки-хозяина. Она встречается только у сравнительно больших вирусов (грипп, герпес). Эта наружная оболочка является фрагментом ядерной или цитоплазматической мембраны клетки-хозяина, из которой вирус выходит во внеклеточную среду. Иногда в наружных оболочках сложных вирусов помимо белков содержатся углеводы, например у возбудителей гриппа и герпеса.

    Каждый компонент вирионов имеет определённые функции: белковая оболочка защищает их от неблагоприятных воздействий, нуклеиновая кислота отвечает за наследственные и инфекционные свойства и играет ведущую роль в изменчивости вирусов, а ферменты участвуют в их размножении.

    Более сложные по структуре вирусы, кроме белков и нуклеиновых кислот, содержат углеводы, липиды. Для каждой группы вирусов характерен свой набор белков, жиров, углеводов и нуклеиновых кислот. Некоторые вирусы содержат в своём составе ферменты.

    Взаимодействие вируса с клеткой

    Вирусы вне клетки представляют собой кристаллы, но при попадании в клетку “оживают”. Их размножение происходит особым, ни с чем не сравнимым способом. Сначала вирионы проникают внутрь клетки, и освобождаются вирусные нуклеиновые кислоты. Затем "заготавливаются" детали будущих вирионов. Размножение заканчивается сборкой новых вирионов и выходом их в окружающую среду.

    Встреча вирусов с клетками начинается с его адсорбции, то есть прикрепления к клеточной стенке. Затем начинается внедрение или проникновение вириона в клетку, которое осуществляет она сама. Однако, как правило, проникновению вируса в цитоплазму клетки предшествует связывание его с особым белком-рецептором, находящимся на клеточной поверхности.

    Связывание с рецептором осуществляется благодаря наличию специальных белков на поверхности вирусной частицы, которые "узнают" соответствующий рецептор на поверхности чувствительной клетки. На одной клетке могут адсорбироваться десятки, и даже сотни вирионов. Участок поверхности клетки, к которому присоединился вирус, погружается в клетку. Этот процесс называется виропексисом.

    Инфекционный процесс начинается, когда проникшие в клетку вирусы начинают размножаться, т.е. происходит редупликация вирусного генома и самосборка капсида. Для осуществления редупликации нуклеиновая кислота должна освободиться от капсида. После синтеза новой молекулы нуклеиновой кислоты она одевается, синтезированными в цитоплазме клетки – вирусными белками – образуется капсид.

    Накопление вирусных частиц приводит к выходу их из клетки. Для некоторых вирусов это происходит путем "взрыва", в результате чего целостность клетки нарушается и она погибает другие вирусы выделяются способом, напоминающим почкование. В этом случае клетки организма могут долго сохранять свою жизнеспособность.

    Поразительно, как вирусы, которые в десятки и даже сотни раз меньше клеток, умело, и уверенно распоряжаются клеточным хозяйством. Размножаясь, они истощают клеточные ресурсы и глубоко, часто необратимо, нарушают обмен веществ, что, в конечном счете, является причиной гибели клеток.

    Типы вирусных инфекций

    В зависимости от длительности пребывания вируса в клетке и характера изменения её функционирования различают три типа вирусной инфекции.

    Если образующиеся вирусы одновременно покидают клетку, то она разрывается и гибнет. Вышедшие из неё вирусы поражают новые клетки. Так развивается литическая (разрушение, растворение) инфекция.

    При вирусной инфекции другого типа, называемой персистентной (стойкой), новые вирусы покидают клетку-хозяина постепенно. Клетка продолжает жить и делится, производя новые вирусы, хотя её функционирование может измениться.

    Третий тип инфекции называется латентным (скрытым). Генетический материал вируса встраивается в хромосомы клетки и при её делении воспроизводится и передаётся дочерними клетками.

    • По сердцевине: ДНК-содержащие и РНК-содержащие (ретро) вирусы.
    • По структуре капсомеров: Изометрические (кубические), спиральные, смешанные.
    • По наличию или отсутствию дополнительной липопротеидной оболочки:
    • По клеткам-хозяинам.
    • Кроме этих классификаций есть еще много других. Например, по типу переноса инфекции от одного организма к другому.

      Классификация и свойства вирусов гепатита:

      www.gepatit-c.ru

      Антигенная структура. У вируса гепатита В выделяют четыре антигена:

      У вируса гепатита В выделяют четыре антигена:

      1. HBs-Ag (superficiales)поверхностный, белок внешней оболочки, включает 3 полипептидных фрагмента: preS1 – большой полипептид, иммуногенный, preS2 – средний полипептид, рецепторный (ответственен за адгезию вируса на гепатоцитах), S – малый мажорный полипептид. Помимо полипептидов в состав входят углеводы и липиды. По антигенной характеристике HBs-Ag различают 4 субтипа (фенотипа): adw, adr, ayw, ayr. HBs-Ag появляется в крови через 1,5 месяца после инфицирования и циркулирует в ней. Содержание HBs-Ag в крови в высоких концентрациях свидетельствует о хроническом гепатите, когда вследствие внедрения генома вируса в генотип гепатоцита преобладает синтез оболочки над компонентом сердцевины.

      2. HBcor-Ag (cor – сердцевина)сердцевинный, белковой природы, в крови в свободном виде не находится, только в ядрах или цитоплазме гепатоцитов (маркер репликации вируса в клетках печени).

      3. HBe-Ag (антиген инфекциозности) – представляет собой секретируемую растворимую часть HBcor-Ag, индикация HBе-Ag в сыворотке крови косвенно подтверждает наличие HBcor-Ag в гепатоцитах, доказывая способность вируса к репликации (показатель активной инфекции).

      4. HBx-Ag – белковый сердцевинный антиген, малоизучен, опосредует злокачественную трансформацию клеток печени.

      Особенности репродукция вируса.

      Репродукция вируса происходит в гепатоцитах. Сначала коротка цепь ДНК достраивается по длинной с помощью ДНК-полимеразы. Достроенные вирионы содержат полноценную ДНК, способную к репликации.

      Плохо культивируется в лабораторных условиях. Выращивают в:

      · Культуре клеток, полученных из ткани первичного рака печени (не оказывают ЦПД, малое накопление вирионов);

      · Восприимчивых животных (шимпанзе, гориллы, орангутанги);

      · В куриных эмбрионах не культивтруется.

      Вирус гепатита В устойчив к низким и высоким температурам, химическим и физическим воздействиям. При комнатной температуре сохраняется 3 месяца, в холодильнике – 6 месяцев, в замороженном виде (-20 0 С) – 15-20 лет, при кипячении – до 30 минут, автоклавировании (120 0 С) – 5 минут, в сухожировом шкафу (160 0 С) – 2 часа. Устойчив к дез. растворам (в 2% растворе хлорамина инактивируется через 2 часа, 1,5% растворе формалина – 7 дней). В высушенной плазме сохраняет жизнеспособность 25 лет.

      Источник инфекциибольные люди острым и хроническим гепатитом В, носители (в мире насчитывается около 400 млн.).

      Механизм передачи инфекции:

      · Парентеральный (пути – трансфузионный, артифициальный – через медицинские инструменты, половой, контактно-бытовой – через предметы личной гигиены – зубные щетки, расчески, ножницы).

      · Вертикальный (путь – трансплацентарный).

      Очень низкая инфицирующая доза.

      Группы риска: гематологические больные, наркоманы, гомосексуалисты, медицинские работники (хирурги, стоматологии).

      helpiks.org

      3.Возбудители гепатитов а, в и с. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

      Вирус гепатита В. Вирусный гепатит – системное заб, вызываемое вирусом гепатита В, хар-ся преимущественным поражением печени. ирусы гепатита В. Сем. Hepadnaviridae, р.Orthohaepadnavirus.

      Морфология и антигенная структура. Вирионы гепатита В имеют вид сферич.образований . Сердцевина вируса состоит из антигена HbcAg, инфекционного антигена – HBeAg, особого фермента РНК-зависимой ДНК-полимеразы и генома, представленного своеобразной кольцевой двухспиральной ДНК. Сердцевина окружена оболочкой, содержащей поверхностный антиген HBsAg гликопротеидной природы. НВс- и НВе-антигены — один и тот же полипептид. Резистентность. устойчивы к высокой Т, особенно если нах-ся в сыворотке кр: в теч. Неск. минут выдерживают кипячение. Эпидемиология. Основной мех-м передачи инфекции – парентеральный. Заражение происходит при хирургических операциях, взятии и переливании крови, инъекциях и других манипуляциях, сопровождающихся нарушениями целостности слиз.покровов. Вирус гепатита В может передаваться от матери ребенку во время беременности и родов, а также половым путем, в основе которого лежит парентеральный путь передачи. Патогенез и клиническая картина. Вирусы проникают в кровь парентерально, с кровью переносятся в печень и размножаются в гепатоцитах. Развиваются различные формы болезни: тяжелый гепатит с высокой летальностью и переходом в хроническую форму; длительное носительство; первичный рак печени.

      Иммунитет. Хронические формы — иммунодефицит; при острых формах иммунодефицит носит преходящий характер.Свыше 5 % случаев гепатита В заканчивается носительством HBs-антигена, являющегося основным показателем перенесенной хронической инфекции и носительства. Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служит кровь больного, в которой определяются антигены вируса и антитела против них – анти-HBs, анти-НВс и анти-НВе классов IgM и IgG. Для этого применяют серологические реакции: ИФА, РИА, РНГА. В будущем важное место займет метод ДНК-гибридизации, позволяющий определять ДНК вируса в крови и клетках печени. Лечение. Современный метод лечения сводится к применению иммуномодуляторов, в частности интерферона-реаферона, полученного методом генетической инженерии. Профилактика. Неспецифическая профилактика основана на предупреждении парентерального заражения при инъекциях, переливаниях крови, операциях, выявлении носителей и отстранении их от донорства, использовании медицинских инструментов одноразового пользования. Для специфической профилактики разработана и применяется рекомбинантная вакцина из HBs-антигена, полученная методом генетической инженерии.

      Гепатит С вызывается вирусом, отличающимся от вируса гепатита В. Относится к сем.Flaviviridae, р.Hepacivirus, РНК-содержащий вирус, сложно устроенный. Чувствителен к эфиру, УФ-лучам, детергентам. Возбудитель передается парентерально. Наиболее часто заболевают лица после повторных переливаний крови. В половине случаев процесс переходит в хрон.заб. с возможным развитием цирроза или первичного рака печени. Лечение – интерферон и рибавирин. Неспецифическая профилактика гепатита С такая же, как и при гепатите В. Специфическая профилактика не разработана.

      Вирус гепатита А. Гепатит А – острое инфекционное заболевание, которое характеризуется лихорадкой, поражением печени, в ряде случаев – желтухой и склонен к эпидемическому распространению.

      Таксономия, морфология, антигенная структура. Вирус гепатита А относится к семейству Picornaviridae, роду Hepatovirus. По структурной организации и химическому составу сходен с другими энтеровирусами, имеет один вирусспецифический антиген. Резистентность. ВГА отличается от других энтеровирусов большей устойчивостью к нагреванию Эпидемиология. Болеют преимущественно дети в возрасте от 4 до 15 лет. Источником инфекции- больные. Механизм передачи инфекции – фекально-оральный. Патогенез и клиническая картина.. Выделяют три клинические формы гепатита А: желтушную (безжелтушную, бессимптомную. Течение заболевания, как правило, доброкачественное, без тяжелых осложнений. Хронические формы не развиваются. Иммунитет стойкий. Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом служат кровь (сыворотка) и фекалии больного. При ранней диагностике основное значение имеет обнаружение нарастания титра антител класса IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электронной микроскопии (ИЭМ). Этими же методами можно обнаружить вирусы или вирусный антиген в фекалиях больных. Выделения вирусов не проводят из-за отсутствия методов, доступных для практических лабораторий. Специфическая профилактика и лечение. Для профилактики гепатита А используют иммуноглобулин. Препарат вводят детям в предэпидемический период, а также лицам, имевшим контакт с больными. Людям, выезжающим в регионы с высоким уровнем заболеваемости по гепатиту А, рекомендуется введение инак-тивированной культуральной вакцины.

      studfiles.net

      3.4. Антигенная структура

      Общепризнанная серологическая классификация эшерихий, разработанная Ф. Кауфманом (1959), основана на анализе О-, К- и Н-антигенов.

      В 1963 году -было установлено 146 вариантов О-антигенов, 88 вариантов К-антигенов (Станиславский Е.С., Жванецкая М.И., 1963), до конца 80-х годов у эшерихий была известна 171 серологическая разновидность О-антигенов, более 100 разновидностей К-антигенов и 60 разновидностей Н-антигенов (Зароза ВТ., 1991).

      По данным В.И. Покровского с соавт. (1999), в настоящее время установлено 173 О-серогруппы и 56 типов Н-антигена E.coli, а также около 80-ти типов Н-антигенов, однако лишь незначительная часть способна вызывать кишечные инфекции у животных и человека (Малов В.А., Пак С.Г., 1996).

      О-антигены — термостабильные соматические, не разрушаются при температуре 100°С в течение 2 часов и от действия алкоголя. По химической природе они представляют липополисахаридно-белковый комплекс, который определяет серогрупповую специфичность штаммов и содержится в клеточной стенке. Разные серологические группы эшерихий отличаются друг от друга по углеводному составу полисахаридов.

      К-антигены — поверхностные или капсульные, обозначаемые L, В и А. Большая часть их — кислые полисахариды, но имеются штаммы белковой природы (L-антигены) или различного химического состава. L-антигены термолабильны, разрушаются при 100°С в течение одного часа. В-антиген термолабилен, при 100°С утрачивает антигенные свойства, но сохраняет агглютинабельность.

      А-антиген (капсульный) термостабильный, при 100°С не разрушается в течение 2,5 часов.

      Н-антиген (жгутиковый) содержится у подвижных штаммов эшерихий, термолабильный, белковой природы. Один и тот же Н-антиген может встречаться у бактерий разных серогрупп.

      Поверхностные (L, В, А) антигены препятствуют агглютинации бактерий соответствующей О-сывороткой, поэтому при серогрупповой типизации культур эшерихий их подвергают термической обработке: прогреванию в водяной бане или автоклавированию.

      Сочетание О-, К- и Н-антигенов характеризует серологический варант бактерий.

      Согласно международной договоренности о порядке размещения символов в антигенной формуле, на первое место ставится показатель О, на второе К и на третье Н. В антигенной формуле эти группы разделяются между собой двоеточием и каждая из них имеет порядковый номер арабскими цифрами.

      Ведущая роль в развитии диареи новорожденных поросят, телят и ягнят принадлежит энтеротоксигенным штаммам эшерихий с адгезивными антигенами К88, К99, 987Р, F41, F18, А20 Att25. Наиболее часто у телят вызывают заболевания штаммы эшерихий следующих серогрупп — О8, О9, O15, О20, O26,035, O78, O86, О101, О115, О119, O141, реже — О2, ОЗЗ, O41, O55, О103, O127, O137; у поросят — O8, 026, 033, О101, O138, О 139, O14I, O142, 0149, O151, O157; у ягнят -О4, О8, О9, O15, O20, O26, O35, O41, 078, О101, O137; у птиц — O1, О2, О8, 015, O18, O26, O55, O78, O l 11,0115, O126, O141.

      До 2000 года ветеринарные лаборатории страны не проводили идентификацию эшерихий серогруппы 0157 из-за отсутствия инструктивных документов по их диагностике.

      В связи с установлением этиологической роли Е. coli серогруппы O157 (серовары О157:Н7 и O157H-), образующих шигоподобный вероцитотоксин, в патологии молодняка животных в существующий диагностический набор агглютинирующих О-сывороток дополн­тельно включена сыворотка серогруппы 0157.

      Необходимо отметить, что Е. coli О157:Н7 имеют антигенные связи с другими эшерихиями (табл. 3).

      Антигенные связи Е. coli О157:Н7 и эшерихий других серогрупп

      studfiles.net

      Вирусные гепатиты наносят огромный ущерб здоровью населения и экономике всех стран мира. Они подразделяются на энтеральные — гепатиты А и Е и парентеральные — гепатиты В, С, D, F, G и др. Вирусы парентеральных гепатитов описаны в главе 14. Вирус гепатита А вызывает острую инфекционную болезнь, характеризующуюся лихорадкой, преимущественным поражением печени, интоксикацией, иногда желтухой и отличающуюся склонностью к эпидемическому распространению. Антропоноз. Заболевание (под другим названием) известно с глубокой древности и описано еще Гиппократом в IV—V вв. до н. э. Вирус гепатита А открыт в 1973 г. С. Фейнстоном. Таксономия, морфология и антигенная структура. Вирус гепатита А относится к семейству Picornaviridae, роду Hepatovirus. Это РНК-содержащий вирус, просто организованный, имеет диаметр 27—28 нм и один вирусспецифический антиген. Культивирование.

      Вирус гепатита А выращивают в культурах клеток. Цикл репродукции более длительный, чем у энтеровирусов, цитопатический эффект не выражен. Резистентность. Вирус гепатита А отличается большей, чем у энтеровирусов, устойчивостью к нагреванию; он сохраняется при 60 °С в течение 12 ч, инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Относительно устойчив во внешней среде (воде, выделениях больных). Восприимчивость животных. Экспериментальную инфекцию возможно воспроизвести на обезьянах — мармозетах и шимпанзе. Эпидемиология.

      Источником инфекции являются больные как с выраженными, так и с бессимптомными формами инфекции. Механизм заражения фекально-оральный. Вирусы выделяются с фекалиями, начиная со второй половины инкубационного периода и в начале клинических проявлений; в это время больные наиболее опасны для окружающих. С появлением желтухи интенсивность вьщеления вируса снижается. Вирусы гепатита А передаются через воду, пищевые продукты, предметы обихода, грязные руки, в детских коллективах — через игрушки, горшки. Вирусы способны вызывать водные и пищевые эпидемические вспышки. Гепатит А распространен повсеместно, но особенно в местах с дефицитом воды, плохими системами канализации и водоснабжения и низким уровнем гигиены населения. Болеют преимущественно дети в возрасте от 4 до 15 лет.

      Подъем заболеваемости наблюдается в летние и осенние месяцы. Патогенез. Вирус гепатита А обладает гепатотропизмом. После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда через портальную вену они проникают в печень и репродуцируются в цитоплазме гепатоцитов. Повреждение гепато-цитов возникает не за счет прямого цитопатического действия, а в результате иммунопатологических механизмов. Клиника. Инкубационный период составляет от 15 до 50 дней, чаще около месяца. Начало острое, с повышением температуры тела и явлениями со стороны ЖКТ (тошнота, рвота и др.). Возможно появление желтухи на 5—7-й день. Клиническое течение заболевания, как правило, легкое, без тяжелых осложнений; у детей до 5 лет обычно бессимптомное.

      Продолжительность заболевания 2—3 нед. Хронические формы не развиваются. Иммунитет. После инфекции формируется стойкий пожизненный иммунитет, связанный с IgG. В начале болезни в крови появляются IgM, которые сохраняются в организме в течение 4—6 мес и имеют диагностическое значение. У детей 1-го года жизни обнаруживаются антитела, полученные от матери через плаценту. Помимо гуморального, развивается и местный иммунитет в кишечнике. Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом служат кровь (сыворотка) и кал.

      Диагностика основана главным образом на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электронной микроскопии. Этими же методами можно обнаружить вирусный антиген в кале. Вирусологическое исследование не проводят из-за отсутствия методов, доступных для практических лабораторий. Лечение. Лечение симптоматическое. Профилактика. Неспецифическая профилактика должна быть направлена на повышение санитарной культуры населения, улучшение водоснабжения и условий приготовления пищи. Для специфической пассивной профилактики используют иммуноглобулин для лиц или контингентов, направляющихся в эндемичные районы на короткий срок. Иммунитет сохраняется около 3 мес. Для специфической активной профилактики разработаны инактивированная, а также рекомбинантная вакцины.

      tworace.clan.su

      Вирус гепатита D, BГD (Hepatitis Delta virus, HDV)

      Вирус гепатита D — возбудитель гепатита D (Дельта гепатита). BГD не принадлежит ни к одному из известных семейств вирусов животных. По своим свойствам BГD наиболее близок к вироидам и сателлитньм вирусам растений. В 1977 г. итальянский исследователь М. Риссетто при помощи метода флюоресцирующих антител обнаружил в гепатоцитах больных хроническим гепатитом В антиген, отличный от антигенов вируса гепатита В . Выявленный антиген был назван дельта-антигеном. Эксперименты по заражению шимпанзе материалом, содержащим дельта-антиген, продемонстрировали, что он является частью трансмиссивного агента (дельта-агента или BГD), вызывающего гепатит, отличный от других вирусных гепатитов.

      BГD — сферическая частица со средним диаметром 36 нм (с колебаниями от 28 до 39 нм), состоящая из ядра (HDAg) и внешней оболочки, образованной поверхностным антигеном вируса В . Плавучая плотность в градиенте CsCI — 1,25 /см3 . Морфологически частицы BГD, циркулирующие в крови больных дельта-гепатитом или носителей BГD, сходны с частицами Дейна, но с менее четко очерченным ядерным антигеном.

      Геном BГD представлен однонитевой, циклической молекулой РНК, состоящей приблизительно из 1700 нуклеотидов. В BГD, циркулирующем в крови больных острой или хронической дельта-инфекцией, РНК BГD образует палочковидную неразветвленную структуру. Характер плотной упаковки генома определяется высокой степенью комплиментарности нуклеотидов, входящих в его состав. Причем, сочетание пар оснований гуанин-цитозин, составляет до 60%. Анализ нуклеотидных последовательностей РНК BГD нескольких изолятов вируса выявил их частичную гетерогенность (от 72,1% до 92,0% гомологии). В геноме BГD имеется несколько открытых рамок считывания, как на геномных, так и на антигеномных нитях РНК. Причем, в отличие от вироидов и сателлитных вирусов растений в РНК закодирован вирусспецифический полипептид — HDAg (пятая открытая рамка считывания, локализованная на комплементарной зоне РНК BГD).

      Выявлено две разновидности HDAg с молекулярными массами в 24 и 27 кД. На их поверхности расположен общий эпитоп, определяемый при помощи моноклональных антител человеческого происхождения. Считается, что малая форма HDAg необходима для репликации BГD, а большая для постройки вирусной частицы. Дельта-антиген локализуется в ядрах инфицированных гепатоцитов, в ядрышках и/или нуклеоплазме.

      HDAg имеет выраженную РНК-связывающую активность. Связывание происходит благодаря узнаванию антигеномной уникальной вторичной структуры РНК BГD, что определяет строгую специфичность связывания и объясняет отсутствие взаимодействия с другими вирусными и клеточными РНК. При нагревании BГD происходит укрепление связи HDAg с РНК, которая становится устойчивой к действию мочевины, гуанидина или меркаптоэтанола. Дельта-антиген устойчив к нагреванию, действию кислот и нуклеаз, но разрушается в присутствии щелочей и протеаз. Он обладает антигенной активностью и может быть использован для конструирования диагностических препаратов.

      Механизм прикрепления, проникновения и раздевания BГD в клетках мало изучен. Вместе с тем считается, что HBsAg, покрывающий дельта-антиген, кодированный S-геном вируса гепатита В (включая pre-SI, pre-S2 и S-зону),необходим для прикрепления BГD к поверхности гепатоцита. При этом в отличие от частиц Дейна, в которых HBsAg представлен частицами с pre-Sl, pre-S2 и S-пептидами в соотношении 1:1:4, в дельта-вирусе это соотношение составляет 1:5:95.

      Инфицированные гепатоциты содержат как геномные (+), так и антигеномные (-) молекулы РНК BГD в соотношении 5-30:1. РНК BГD представлена линейными и циклическими формами. Общее количество молекул РНК BГD может достигать 100000-300000 копий в одной клетке.

      Репликация РНК BГD происходит в ядре зараженного гепатоцита; по аналогии с вироидами она может быть описана следующим образом: на кольцевой молекуле геномной РНК (+) при помощи клеточного фермента (возможно ДНК-зависимой РНК-полимеразы II) синтезируется комплиментарная (-) цепь РНК. Синтез нуклеиновой кислоты осуществляется согласно модели раскручивающегося кольца с вытеснением 5′ конца РНК с последующим синтезом плюс-цепи. Возможно, антигеномные нити РНК сворачиваются в кольцо с последующим синтезом геномных РНК BГD. Расщепление линейных олигомерных структур РНК осуществляется при помощи клеточных ферментов. Процесс РНК РНК копирования может происходить по симметричному и асимметричному пути.

      Вопросы, связанные с транскрипцией и трансляцией гена, кодирующего HDAg, до сих пор полностью не решены. Имеется скудная информация и о таких этапах морфогенеза, как сборка и выход вируса из гепатоцита.

      Вирус гепатита D не может участвовать в развитии гепатитной инфекции без одновременной репликации вируса гепатита В. Этот факт определяет две возможные формы их взаимодействия: одновременного инфицирования ВГВ и BГD — коинфекция и инфицирования ВГD носителя вируса гепатита В — суперинфекция. Характер взаимосвязи этих вирусов определяется не только использованием HBsAg для формирования внешней оболочки BГD, но и другими, до конца непонятными взаимодействиями. Так, BГD ингибирует репликацию ВГВ, приводя к уменьшению экспрессии HBcAg и HBsAg и угнетению активности ДНК-полимеразной активности в течение острой инфекции. Одним из возможных объяснений этого факта являются данные о стимуляции дельта-вирусом внутриклеточного синтеза интерферона , который вызывает ингибицию репликации ВГВ.

      Последнее время получены экспериментальные данные, что дельта-вирус может размножаться в организме приматов и без участия вируса гепатита В, но при этом никаких повреждений не наблюдается. Предположительно наружная оболочка дельта-вируса формируется из клеточных белков, вследствие чего его обнаружение затруднено.

      Анализ инфекционной активности дельта-вируса показал, что она приблизительно на пять порядков ниже по сравнению с ВГВ. Инфицирование дельта-вирусом может вызвать острое заболевание, заканчивающееся выздоровлением или формированием хронического носительства BГD. Экспериментальное заражение дельта-вирусом человекообразных обезьян-носителей HBsAg и сурков-носителей вируса гепатита сурков вызывает острую суперинфекцию. При этом через 2 недели после заражения в гепатоцитах животных удается идентифицировать дельта-антиген, который по своим физико-химическим и иммуногенным свойствам идентичен дельта-антигену из гепатоцитов больного человека. Полученный при экспериментальной дельта-вирусной инфекции у сурков дельта-антиген с успехом используется для приготовления коммерческих диагностических препаратов, применяющихся для выявления серологических маркеров дельта-инфекции у людей.

      Дельта-вирусную инфекцию удалось также воспроизвести и при заражении дельта-вирусом пекинских уток-носителей вируса гепатита пекинских уток.

      Дельта-вирус может быть обнаружен в гепатоцитах и в крови больных острой и хронической дельта-инфекцией. Применение иммуноэлектронной микроскопии, при которой используются антитела к HBsAg, позволяет изучать морфологию дельта-вируса. Маркерами, свидетельствующими о наличии дельта-вируса в исследуемом материале, служат дельта-антиген и/или PHK BГD.

      Для обнаружения дельта-антигена в биопсийном или аутопсийном материале применяют метод флюоресцирующих антител и иммунопероксидазные методы, когда комплекс дельта-антигена и антител к нему, меченных пероксидазой хрена, визуализируют при помощи гистохимической реакции на пероксидазу.

      В сыворотке крови дельта-антиген определяют при помощи иммуноферментного или радиоиммунного анализа лишь только после того, как исследуемый материал обрабатывается неионными детергентами (твин, тритон и др. ), разрушающими наружную оболочку вируса, тем самым делая доступными антигенные детерминанты HDAg.

      Детекцию РНК BГD проводят при помощи кДНК-гибридизации с зондами, полученными генноинженерным путем, или же методом амплификации кДНК ВГD , позволяющим выявлять до 103 молекул РНК BГD.

      Культивирование BГD в клеточных линиях, в том числе печеночного происхождения с интегрированным геномом ВГВ, до сих пор были неудачны. Вместе с тем, описаны эксперименты по продукции BГD в линии клеток гепатомы человека (HUH-7) и почек мартышек (COS7) после их трансфекции РНК ВГD.

      www.hcv.ru

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *