Качественная диагностика гепатитов

Сущность и диагностика гепатита B

Как только стадия переходит в желтушную, начинают желтеть кожные покровы, слизистые оболочки, самочувствие резко ухудшается. Важно подчеркнуть, что печень увеличивается в размерах и выступает из-под реберной дуги. Окрашивание кожных покровов в желтый оттенок происходит постепенно. Количество печеночных ферментов растет в крови, а тимоловая проба не изменяется.

Диагностирование болезни: основные методы и понятия

Диагностика гепатита В проводится несколькими путями:

1. Для начала врач должен собрать анамнез и провести скрупулезный опрос человека. Во время опроса большой акцент ставится на такие моменты, как:

  • присутствовало ли введение наркотических или иных средств внутривенно;
  • были ли переливания кровяной массы;
  • проводились ли вмешательства хирургического характера;
  • присутствовали ли повреждения целостности кожи;
  • каковы сексуальные отношения;
  • имелось ли у больного контактирование с болеющим гепатитом В или его носителем.
  • Если что-либо из данных пунктов имело место, то уточняется, в течение какого времени. Обычно заражение фигурирует при контактировании от 6 недель до полугода до проявления первых симптомов гепатита.

    2. Лабораторная диагностика гепатита В, ИФА-анализ крови на антигены и антитела к гепатиту В. Этот вид обследования направлен для того, чтобы выявить 3 антигена:

  • НВsАg (антиген, располагающийся поверхностно),
  • НВcАg (расположенный изнутри),
  • НВеАg (взаимосвязанный с предыдущим антигеном). Заболевание характеризуется ранним выявлением данных антигенов в крови.
  • Люди, болеющие гепатитом В и содержащие в крови данные антигены, очень контагиозны. Они способны заражать окружающих людей. Если в крови человека отсутствует НВsАg, это свидетельствует о том, что он здоров. Если человек болен, то организм начинает выделять антитела к имеющимся антигенам.

    3. Диагностика гепатита методикой ПЦР предназначена для выявления в кровеносной системе ДНК HBV. Если результат положительный, то человек болен гепатитом. Анализ на ДНК HBV именуют качественным. Существует и количественный ПЦР. Количественная ПЦР предоставляет возможность выявить нагрузку с присутствием вируса гепатита. Что такое вирусная нагрузка? Это число копий ДНК HBV в 1 мл кровяной массы. Количественный анализ на гепатит показывает активность вируса.

    4. Анализ крови на биохимию. Данный анализ предполагает собой определение количества ферментов, вырабатываемых печенью. К таким ферментам относится АЛТ, АСТ. Они находятся внутри клеток печени — гепатоцитах. Если происходит повреждение печеночных клеток, то ферменты освобождаются и попадают в кровь. Положительный анализ считается лишь тогда, когда количество печеночных ферментов превышает нормы. Обследование свидетельствует о том, есть ли воспалительные процессы в печени и их активность.

    5. Ультразвуковое обследование, эластометрия и т.д. Диагностика гепатита может проводиться и нелабораторными методами. С помощью ультразвукового исследования обследуют органы брюшной полости. УЗИ дает четкую картину при любом воспалительном процессе печени и ее сосудов. Эффективно проведение эластометрии печени. Метод эластометрии дает понятие о степени фиброза в тканях печени.

    6. Наиболее важный анализ — это нахождение в эритроцитарной массе антигенов гепатита В. Если они есть, то это свидетельствует о наличии инфекции в человеческом организме.

    7. Лабораторный тип диагностики гепатита включает в себя определение антигенов и антител в эритроцитарной массе. Самый распространенный НВsАg проявляется в кровеносной системе еще в инкубационном периоде гепатита. Человек не догадывается о развитии у него заболевания, а в крови уже идут изменения. Когда гепатит протекает остро, НВsАg пропадает из крови. Обычно НВsАg нет при первом месяце желтушного периода, а антитела к данному антигену начинают фигурировать в кровеносной системе через 90 дней после инфицирования.

    Положительный анализ на антитела не говорит о том, что человек болен гепатитом. Возможно, что он ранее перенес гепатит без D-агента. Если в крови пациента после проведенной терапии отсутствует НВsАg, но есть антитела, это говорит о хорошем прогнозе, свидетельствующем о выздоровлении больного. Если у пациента хронический или тяжелый гепатит, то антитела могут проявиться уже с первых дней желтушного периода.

    Достоверный эквивалент — проявление в крови анти-НВс IgM. Их выявляют под конец преджелтушного периода. Они присутствуют весь период явных проявлений. Если анализ содержит анти-НВс IgM, то это говорит о том, что вирус продолжает размножаться. При наступлении выздоровления анти-НВс IgM пропадает. Острая фаза заболевания может выдать в анализе анти-НВс IgG. Они будут выявляться в течение всей жизни человека.

    Когда период инкубации гепатита (в особенности аутоимунного) завершается, в крови начинают фигурировать и НВеАg. Они информируют об активном делении и увеличении инфекционных частиц. Как только наступает желтушный период, НВеАg исчезает. На смену ему приходит анти-НВе. Анти-НВе свидетельствует о том, что активность инфекции понижается и скоро наступит выздоровление. Но размножение вируса не приостанавливается!

    Острый гепатит может перейти в хронический. Об этом будет говорить выявленный в крови HВеАg. Если он присутствует, значит, высока вероятность преобразования процесса в хроническую форму. Наличие HВеАg говорит о высокой контагиозности пациента.

    Необходимо помнить, что лабораторная диагностика гепатита В, дающая отрицательный результат по НВsАg, не исключает самого диагноза. Важным решающим звеном является наличие в крови анти-НВс IgМ. Именно данные антитела с точностью подтвердят болезнь. Если анализ крови не содержит анти-НВс IgМ, то это может свидетельствовать о носительстве НВА, а присутствие данных антител говорит об активизации инфекции.

    Обнаружение ДНК гепатита В

    Важнейшим исследованием для определения наличия ДНК вируса считается ПЦР. Анализ свидетельствует об активности инфекционного процесса. С помощью данного метода можно узнать о прогнозах болезни.

    Если гепатит протекает более благоприятно, то ДНК HBV пропадает из крови в начальных периодах инфекционного процесса. Лабораторная диагностика в виде ПЦР дает данные о качестве проводимого лечения (дает ли эффект тот или иной препарат).

    Чтобы уяснить, какую тактику следует предпринять для назначения лечебных мероприятий, нужно провести количественный метод ПЦР. Количественная ПЦР дает данные о положительной реакции от проведенной терапии.

    Основания для диагноза

    Для постановки соответствующего диагноза потребуются следующие обследования:

    1. Ежедневный осмотр, пальпация.
    2. УЗИ печени.
    3. Биохимический анализ крови (проводится неоднократно).
    4. Обследование на HВsАg, НВеАg, анти-НВе, анти-НВс IgМ, анти-НВс суммарные, ДНК НВV.
    5. Маркеры НBV и НСV (исключается вирусный гепатит).
    6. Пункция печени.
    7. Биопсия печени. При помощи специальной иглы совершается прокол брюшной стенки и изъятие небольшого кусочка печени на гистологическое обследование (кусочек имеет размер не более полуграмма). Биопсия — это последний метод обследования на гепатит. Благодаря ей можно наиболее точно говорить о степени активности инфекционного процесса, фиброза печени. Биопсия — это процедура хирургического характера. Она может повлечь за собой осложнения, поэтому часто ее не используют для постановки диагноза.
    8. Фиброэластография. С ее помощью можно оценить плотность печеночной ткани. Методика схожа с ультразвуковым обследованием. В исследовании используется особый датчик, который устанавливают на кожные покровы в месте проекции печени.
    9. Фибротест. Он основывается на подсчете определенных показателей крови.
    10. Хронический гепатит В

      Хронический гепатит В протекает фазово:

      1 фаза — репликация вируса. Вирус размножается с повышенной активностью.

      2 фаза — интеграция. Вирус перестает размножаться. Вирусный геном начинает встраиваться в ДНК нормальных клеток печени — гепатоцитов.

      Чтобы определить скорость прогрессирования вируса, важно понять тяжесть процесса, исход, степень нарушения клеток печени. Лабораторная диагностика хронического гепатита основана на выявлении:

      Если гепатит НВеАg-позитивный (положительный анализ), то в эритроцитарной массе будут находиться:

      • в стадии размножения — НВsАg, НВеАg, анти-НВс IgМ, анти-НВс (суммарные), ДНК НВV;
      • в стадии встраивания в ДНК гепатоцитов — НВsАg, анти-НВе, анти-НВс (суммарные), ДНК НВV.
      • Если гепатит серонегативный, то в кровяной массе будут присутствовать НВsАg, анти-НВе, анти-НВс IgМ, анти-НВс, ДНК НВV. Причем их присутствие никоим образом не зависит от стадии инфекционного процесса.

        Дифференциальная диагностика

        При постановке диагноза врач обязан продифференцировать гепатит В с другими болезнями — гепатитом А, С, Е, D. Завершающий диагноз можно поставить только после выявления в кровяной массе определенных маркеров, специфичных для каждого из гепатитов.

        Гепатит должен быть продифференцирован и с другими важными болезнями: ОРВИ, ЖКБ, пищевым отравлением, кишечной инфекцией, хирургической патологией брюшных органов и многими другими заболеваниями.

        Аутоиммунный гепатит

        Для аутоиммунного гепатита диагностика включает в себя следующие наиболее важные обследования:

      • Анализ эритроцитарной массы (ОАК). Расшифровка: при аутоиммунном гепатите в крови наблюдается анемия (нормоцитарная), пониженное содержание лейкоцитов, тромбоцитов, повышенную РОЭ. Но можно ожидать и более высокую степень анемии.
      • Моча. Расшифровка общего анализа мочи: содержится белок, эритроциты, билирубин.
      • Анализ крови на биохимию. Очень актуальный анализ. Расшифровка: повышенное количество билирубина, повышение аргиназы, понижение альбумина, повышение у-глобулинов, тимоловой пробы. Сулемовая проба понижена. Некоторые показатели могут быть повышены в 2 и более раза. Это положительный анализ на аутоиммунный гепатит.
      • Иммунологический анализ. Расшифровка: Т-лимфоциты-супрессоры понижаются, в эритроцитарной массе появляются волчаночные клетки, число иммуноглобулинов растет, антитела к эритроцитам.

    Положительный анализ на гепатит можно выявить благодаря серологическому методу исследования. Аутоиммунный гепатит — это гетерогенное заболевание.

    101analiz.ru

    / VICh_I_GEPATIT / диагностика вирусных гепатитов

    Лабораторная диагностика вирусных гепатитов.

    Лабораторная диагностика этиологического агента исключительно важна для определения прогноза заболевания, и в особенности (при количественном определении вирусных нуклеиновых кислот) для оценки эффективности противовирусной терапии.

    Вызывается гепадновирусом сферической формы, окружен липидной оболочкой с включенными в нее молекулами поверхностного антигена

    (HBS Ag). Геном представлен кольцевой молекулой ДНК, включающей участки как однонитевой так и двунитевой структуры. Вирусная ДНК состоит их 3200 нуклеотидов и объдиняет 4 гена (P, C, S, X ). Нуклеокапсид содержит сердцевинный антиген ( HBc Ag ) .

    1. ДНК вируса ( HBV DNA ) содержится в сыворотке (в плазме ).

    Ее выявление означает вирусемическую стадию процесса , свидетельствует о высокой репликации вируса .

    При остром ВГВ содержание HBV DNA в крови быстро возрастает в течение инкубационного периода и становится максимальным в начале периода разгара.

    Циркуляция ДНК вируса более 5-6 месяцев — неблагоприятный прогностический признак.

    2. Поверхностный антиген HBS Ag в зрелых вирионах существует в трех различных молекулярных формах : сферические частицы диаметром 22нм ; филаментозные формы длиной 20-200нм ; полноценный вирион (частица Дейна). С точки зрения иммуногенности выделяют различные серотипы

    HBS Ag образующиеся путем сочетания основной антигенной детерминанты а с двумя субдетерминантами , попарно исключающими друг друга ( d/y и w/r ): adw , adr , ayw , ayr . Антиген а обеспечивает формирование общего перекрестного иммунитета ко всем субтипам вируса . HBS Ag является наиболее ранним маркером вирусного гепатита В появляется в крови еще в инкубационном периоде ( на 3-5 неделе от момента инфицирования) и циркулирует в крови при остром течении заболевания до 5-6 месяцев . Обнаружение HBS Ag в крови после 6 месяцев может указывать на начало хронизации процесса .

    Отрицательный HBS Ag указывает на отсутствие ВГВ, но может быть а )- серонегативная стадия инкубационного периода (до 6 мес. после заражения

    б) — латентная инфекция

    Обнаружение HBs Ag проводится с целью:

    диагностики острого и хронического гепатита В.

    дифференциальной диагностики вирусных гепатитов.

    контроля донорской крови и ее препаратов для предотвращения посттрансфузионного гепатита В.

    определение групп риска ( медперсонал, контактные в очагах инфекции )

    предотвращение передачи инфекции от беременных к плоду.

    3. Анти HBs. ( антитела к HBs Ag ). Являются показателем иммунитета к ВГВ или иммунного ответа на вакцинацию против гепатита В.

    При остром ВГВ выявляются в сыворотке крови обычно спустя длительное время ( от 3-4 недель до 1 года ) после исчезновения HBs Ag . Их появление служит критерием развития постинфекционного протективного иммунитета и выздоровления после острого ВГВ.

    При хроническом ВГВ анти — HBs либо отсутствуют, либо обнаруживаются в низких титрах при продолжающейся HBs -антигенемии.

    Обнаружение анти — HBs антител проводится с целью:

    -оценки специфической реактивности иммунной системы пациентов после инфицирования или вакцинации против гепатита В.

    Сердцевидный антиген HBc Ag — ядерный антиген, входит в состав нуклеокапсида вируса. В свободной форме локализуется в ядрах гепатоцитов. В сыворотке крови находится в составе частицы Дейна, и обычными методами не выявляется. Является сильным иммуногеном , вызывает образование антител .

    Анти HBc IgM -антитела к НBc Ag выявляются в сыворотке больного в острой фазе ГВ еще в инкубационном периоде до пика повышения АЛТ и до появления желтухи .через 1-4 недели после. При ОВГВ присутствуют в сыворотке от 2-3 месяцев до1,5 лет. Пик концентрации — начало реконвалесценции . Анти HBc Ig M могут быть единственным серологическим маркером ОВГВ в фазу «окна» по HBS Ag/ анти HBS.

    Анти HBc IgМ обнаруживаются и у больных хроническим ВГВ в период обострения .

    Анти — HBc Ig M являются основным серологическим маркером острого вирусного гепатита В.

    Исчезновение анти — HBс Ig M рассматривается, как окончание острого инфекционного процесса.

    Анти HBc Ig G — определяются в максимальном титре в период реконвалесценции и циркулируют в более низких тирах пожизненно и служат надежным доказательством постинфекции ВГВ.

    Hbeантиген ( антиген инфекционности ) антиген е локализован в сердцевине вириона , не только присутствует в составе вириона , но и циркулирует в крови . При остром вирусном гепатите В обнаруживается в крови уже в инкубационном периоде одновременно или спустя неделю после появления HBS Ag на ранних этапах инфекционного процесса уже при первых клинических проявлениях болезни. Выявление Hbe Ag указывает на высокую репликативную активность вируса ГВ и во много раз увеличивает опасность заражения при попадании инфицированной сыворотки в кровь здорового человека. Следовательно индикация HВe антигена имеет не только диагностическое, но и важное эпидемиологическое значение. Индикация Hbe Ag имеет значение для диагностики различных форм ВГ. Хронический ГВ репликативного типа протекает при стабильной циркуляции Нв е- антигена и отсутствии анти -HВe-антител. При хроническом ГВ интегративного типа,наоборот, анти НВе антитела в крови присутствуют , а HBe -антиген не обнаруживается.

    Обнаружение HBe — антигена производится в сыворотке крови с целью :

    диагностики острой формы гепатита В

    дифференциации типов хронического гепатита В

    контроля за выздоровлением больных гепатитом В.

    8. Антитела к HВe антигену ( анти HBe )появляются при остром вирусном гепатите В уже на 2-3 неделе желтушного периода . Циркулируют анти НВе в крови на протяжении 2 -5 лет , реже нескольких месяцев. Наличие их в сыворотки крови свидетельствует о завершении репликации вируса и начале стадии реконвалесценции.

    Анти -НВе антитела являются важным серологическим маркером ранней реконвалесценции или хронического персистирующего гепатита В.

    Определение анти -Нве антител производится в сыворотке крови с целью :

    определения хроничекого персистирующего гепатита В.

    диагностики начальной фазы реконвалесценции гепатита В.

    Вирусный гепатит В — одна из самых распространенных на земном шаре инфекций. Ежегодно в мире по данным ВОЗ первично заражается ГВ более 50 млн. человек. У 5-10 % из них формируется хроническая инфекция, которая может завершиться циррозом печени или гепатоклеточной карциномой. Ежегодно в мире количество летальных исходов от ГВ достигает 2 млн. человек. За 15-20 лет гибнет больше людей, чем за всю ВОВ.

    Инкубационный период при ГВ варьируется в широких пределах от 45 до 160 дней и чаще составляет 3-4 месяца. Источник заражения является только больной человек. Заражение происходит парентеральным путем ( концентрация вируса ГВ в крови макс. 10 в 8 степени в 1 мл крови достигает). Для заражения 1 человека достаточно 10 частиц. Из 1 мл зараженной крови можно заразить 10млн. человек, из 1 капли крови -500 тыс. человек. Вирус ВГВ обнаруживается в различных секретах и экскретах : в слюне, слезной жидкости, сперме. Т.о. заражение происходит не только парентеральным путем, но и половым и вертикальным ( от матери к плоду) Распространению способствует большое количество вирусоносителей, которые по данным ВОЗ составляют от 0,1 до

    20 % населения страны или региона. Страны Северной, Центральной Европы ,Австралия гипоэндемичны -0,5%т вирусоносителей, Восточная , Южная Европа.,Средний Восток, Азия , Япония — средне эндемичны — 1-7% вирусоносителей. Страны тропической Африки,Южной Америки -гиперэндемичны -от 8 до 20% вирусоносителей.

    Геном представлен двунитевой кольцевой ДНК ( одна нить на одну треть недостроена). Ген S — кодирует HBS A, ген С — кодирует HBc Ag и HbeAg,

    ген Р — кодирует фермент ДНК-полимеразу, ген X — обладает функциями ТАТ -гена( трансактиватор транскрипций), т.е. кодирует белок , который активирует размножение вируса.

    Вирус ВГВ гематогенным путем заносится непосредственно в печень. В патогенезе важную роль играют аутоиммунные гуморальные и клеточные реакции. Предполагают, что поражение гепатоцитов связано не только с непосредственным действием самого вируса , но и с иммунологическими реакциями хозяина, возникающими в связи с модификацией клеточной мембраны вирусными белками, которые индуцируют появление аутоантител к клеткам печени.

    Клиническое течение разнообразно: болезнь может протекать в латентной форме, выявляемой лишь лабораторными методами, в типичной желтушной форме, в злокачественной форме, заканчивающейся летально. Продожительность преджелтушной стадии составляет от одного дня до нескольких недель. Желтушный период, как правило, длительный и характеризуется хорошо выраженными симптомами (желтуха, гипербилирубинемия, потемнение мочи, желтушность склер).

    Постинфекционный иммунитет длительный , пожизненный, обусловлен вируснейтрализующими антителами (анти HBS ) при отсутствии в крови его поверхностного антигена .

    Одним из частых исходов хронического гепатита В является цирроз и рак печени.

    Специфическая профилактика: вакцинация. Стратегия ВОЗ — поголовная вакцинация новорожденных, групп риска в странах, где 2% вирусоносителей.

    Лечение — препараты интерферона (роферон, виферон, лейкиферон) — 3месяца по 6 млн. ед. 3 раза в неделю, и еще 3 месяца по 3 млн. ед. 3 раза в неделю.

    HDV — дефектный вирус, вирус гепатита Дельта не может размножаться без вируса гепатита В (вируса- помощника). Вирион имеет сферическую форму, его диаметр 35-37 нм. Суперкапсид Дельта-вируса состоит из поверхностного антигена ВГВ -HBS Ag . Геном представлен кольцевидной РНК.

    5% носителей ВГВ инфицированы ВГ Дельта. Заражение аналогично ВГВ.

    Смешанные инфекции ВГВ и ВГД встречаются в виде ко — инфекции и супер-инфекции.

    Ко — инфекция — характеризуется одновременным заражением двумя вирусами.

    Следовательноно: имеется острый ВГВ + острый ВГД.

    Супер-инфекция характеризуется тем, что больной хроническим ВГВ заболевает ВГД . Это часто приводит к тяжелому течению болезни , летальность до 70%, циррозу печени.

    Определение антител к ВГД — анти -ВГД Ig G антитела являются основным серологическим маркером инфицированности крови вирусом гепатита Дельта.

    Они обнаруживаются практически у всех лиц с острым ВГД, а также у 95% больных с фульминантной формой гепатита В.

    Семейство Флавивирусы ( Fiaviviridae). Род Hepacevirus.

    Вирион сферической формы, имеет суперкапсид. Геном ВГС представлен однонитевой нефрагментированной позитивной РНК.

    Источник инфекции только человек. Вирус определяется в крови, в сперме, слюне, моче. Распространение вируса происходит трансфузионно при переливании крови и ее препаратов, или инструментальным путем, а также трансплацентарно от матери к плоду. Восприимчивость очень высокая.

    В структуре заболеваемости острыми вирусными гепатитами острый гепатит С в среднем по России составляет 9,4% (1997 год). Официальная регистрация этого гепатита начата в1994 году. За это время показатели заболеваемости ( на 100 тысяч) возросли с 3,2 до 9,04%. О широте распространения гепатита С свидетельствует и частота выявления антител к вирусу гепатита С ( анти-ВГС) среди населения различных стран мира. Частота выявления анти — ВГС в странах Западной Европы 0,1- 1,6%, в США — 0,5 — 1,5%, в странах Восточной Европы и Азии — 1,5 — 4%, в странах Африканского континента — 4 — 10% и выше,

    в Южной Америке -4,5 %.

    Группы риска: медработники — 6%., наркоманы -100 % , больные на гемодиализе — 12%, при переливании крови -50%.

    Инкубационный период — 6-8 недель. Заболевание часто протекает бессимптомно, клиническое течение более легкое, чем при ВГВ, только в 25% отмечается желтуха. Но не зря о нем говорят «ласковый убийца» — в 50 % отмечается хронизация заболевания с последующим развитием в 20% и более цирроза и рака печени. Течение, исход, эффективность лечения интерфероном зависит от генотипа вируса. Существуют генотипы 1А, 2А, 3 А , 1В. Наиболее опасным является генотип 1В. В России доминирует генотип 1В ( 60 — 90 % случаев ).

    Лечение — интерферонотерапия. ( лучше альфа-интерферон) — при остром ВГС инъекции по 3 МЕ 3 раза в неделю в течение 3 месяцев, при хроническом ВГС — 3 МЕ 3раза в неделю на протяжении года.

    Рекомендовано комплексное применение интерферона и рибаверина (per os ).

    Эффективность лечения при ВГС генотипа 2ф , 3ф выше, чем1В .

    Определение антител класса IgG является основным маркером вирусного гепатита С. Обнаружение антител класса М свидетельствует о продолжающейся репликации вируса, что характерно для острой фазы ВГС — инфекции. В латентной фазе заболевания анти — ВГС — М практически не обнаруживаются и вновь появляются во время обострений, большей частью в сочетании с повышением АLT.

    Выявление РНК ВГС методом полимеразно — цепной реакции в качественном и количественном варианте является «золотым стандартом» в диагностике вирусного гепатита С и подтверждением позитивных результатов выявления анти -ВГС.

    studfiles.net

    Как проводится диагностика гепатитов разных типов

    Словом «гепатит» называют целый ряд воспалительных заболеваний печени. Далеко не всегда это заболевание вызывается вирусами, хотя вирусный гепатит — один из самых распространенных. Привести к развитию заболевания могут и другие причины. Как проявляется болезнь, какие меры нужны для точной диагностики гепатита и насколько современные диагностические методы точны?

    Особенности диагностики гепатита

    Чем бы ни был вызван гепатит, разрушения, произведенные им, практически всегда одинаковы — клетки печени перестают выполнять свои функции и гибнут.

    Самая распространенная группа гепатитов. Разрушения в клетках печени происходят из-за проникновения в организм специфических вирусов. Различают несколько форм вирусного гепатита — A, B, C, D, E и G.

    А, В, D и Е проявляются относительно одинаково — диарея, тошнота и рвота, нарастающая слабость, боль в области желудка и правого подреберья, пожелтение кожных покровов и белков глаз, увеличение печени в размерах. Гепатиты С и G более коварны и нередко долгие годы единственным симптомом является непреходящая усталость.

    Лабораторные методы диагностики являются основными при выявлении заболевания. Обязателен ПЦР-анализ на выявление фрагментов РНК вируса и иммунологическое исследование, определяющее наличие антител к вирусу. Также необходимо сделать биохимический анализ крови, определить уровень билирубина и ферментов (например, АлТ, АсТ).

    Не только вирусы, но и токсины растительного и искусственного происхождения могут вызвать гепатит. Различные отравляющие вещества, яды, которые содержатся в растениях и грибах, способствуют гибели клеток печени. Диагностика гепатита этого типа проводится путем выявления уровня билирубина, альбумина и протромбина, а также ферментов.

    Печень — самый крупный и многофункциональный внутренний орган. Он выполняет около 500 функций, среди которых — очистка организма от токсинов, обработка питательных веществ, производство белков и многое другое.

    Одним из проявлений лучевой болезни, которая возникает из-за радиационного воздействия, является лучевой гепатит. В клинической практике данное заболевание встречается редко. Чтобы возник риск развития этой болезни, человек должен достаточно долго (в течение 3-4 месяцев) получать дозы радиации, превышающие 400 рад. Главный лабораторный метод диагностики лучевого гепатита — биохимический анализ крови и анализ на билирубин.

    Это редкая форма гепатита, и наука до сих пор не может объяснить, почему такое заболевание возникает. При аутоиммунном гепатите защитная система дает сбой и начинает атаковать клетки печени так, словно это чужеродные организмы. Данная форма гепатита часто сопровождает другие аутоиммунные заболевания, но может развиваться и самостоятельно. Для лабораторной диагностики аутоиммунного гепатита исследуется уровень гамма-глобулинов и IgG (болезнь можно заподозрить, если их показатели выше нормальных вдвое и больше), АсТ, АлТ.

    Методы лабораторной диагностики вирусных гепатитов

    Поскольку вирусные гепатиты распространены шире всего, остановимся на лабораторных методах их диагностики подробнее. Следует сказать, что именно анализ крови может дать больше всего информации об этом заболевании. Инструментальные методы (КТ, МРТ, УЗИ) для диагностики гепатита малоэффективны, они могут дать информацию о состоянии и структуре печени, но не о том, какой именно вирус поразил организм и как давно это произошло.

  • Общий и биохимический анализ крови. Для этого типа гепатита характерны низкий уровень лейкоцитов и высокая скорость оседания эритроцитов (СОЭ), пониженный альбумин и билирубин.
  • Выявление антител к вирусу. Антитела к вирусу гепатита А Анти-НАV IgM можно обнаружить в самом начале заболевания, при появлении первых симптомов, сразу после окончания инкубационного периода. Самый надежный метод диагностики — ПЦР-анализ, позволяющий побнаружить в сыворотке крови антитела даже тогда, когда их концентрация ничтожно мала. Более того, метод ПЦР дает информацию о том, когда именно произошло заражение.
  • Анализ на определение РНК вируса. ПЦР-анализ дает возможность обнаружить и фрагменты РНК вируса гепатита А.
  • Лабораторные исследования при вирусном гепатите следует проводить дважды, чтобы исключить возможность ложноотрицательного или ложноположительного результата.

  • Общий и биохимический анализ крови. Как и при гепатите А, этот анализ позволяет оценить изменения в работе и состоянии печени.
  • Анализ на антигены. HBsAg — самый ранний маркер этого вируса, его можно обнаружить уже в инкубационном периоде. Количественное определение этого антигена используют не только для подтверждения диагноза, но и для определения стадии — острой или хронической.
  • Анализ на антитела к антигенам вируса. Наличие антител к HB-core Ag может говорить о том, что человек когда-то переболел гепатитом В, поскольку эти антитела сохраняются в крови еще очень долго после выздоровления, иногда — всю жизнь.
    • Анализ на антитела. При проведении выявляется наличие антител IgM.
    • Анализ на определение РНК вируса. Проводится методом ПЦР, позволяет выявить болезнь на ранней стадии и избежать ее перехода в хроническую форму.
    • Определение интерлейкина 28 бета. Анализ, проводится методом ПЦР, позволяет спрогнозировать возможную эффективность лечения.
    • Общий и биохимический анализ крови.
    • Определение антител к антигенам. В момент, когда заболевание находится в острой стадии, анализ показывает высокое содержание антител IgM. После этого в течение какого-то времени могут быть обнаружены другие антитела — IgG.
    • Определение РНК вируса. При помощи ПЦР-метода РНК вируса можно обнаружить даже при его малой концентрации. Анализ дает информацию не только о типе вируса, но и о стадии болезни.
    • Анализ на определение антител. Это основной лабораторный метод диагностики гепатита Е. Он показывает наличие антител IgM и IgG.

    Лабораторные исследования — крайне важная часть диагностики гепатита, и если у вас есть подозрение на это заболевание, необходимо срочно сдать анализы. От их результатов зависит схема и эффективность лечения гепатита.

    Как врач определяет оптимальный тип анализа на выявление вируса гепатита?

    «Пациенту вообще не нужно думать, какие анализы включает в себя диагностика вирусных гепатитов и какой метод исследования выбрать. Это определит врач, — говорит эксперт лаборатории «Инвитро». — Диагностика гепатита — отработанная схема. Сначала врачу нужно выяснить состояние печени, выявить изменения в ее функционировании, определить степень поражения. Для этого проводится биохимический анализ крови — по уровню ферментов, липидов, соотношению белковых фракций специалист может определить, какие именно процессы происходят в печени. Общий анализ крови дает информацию о воспалительных процессах и позволяет подтвердить наличие инфекции, хотя и не может сказать, с каким именно возбудителем мы имеем дело. На этот вопрос отвечают другие анализы — иммунологические исследования на определение антител и анализы, выявляющие наличие РНК/ДНК вируса. Выделив РНК/ДНК, врач точно может сказать, какой тип гепатита поразил печень, как давно это произошло и в какой стадии находится заболевание. Получив данную информацию, можно приступать к лечению. Именно поэтому своевременное и качественное проведение лабораторных анализов так важно — любая ошибка на каждом этапе может привести к тому, что специалист получит неверные данные и выбранная на их основе терапия окажется неэффективной. Я настоятельно рекомендую отнестись к выбору лаборатории для проведения исследований серьезно. Обратите внимание на такие моменты, как наличие собственного исследовательского комплекса, система контроля качества, квалификация сотрудников и выбор анализов. Большое количество проводимых исследований говорит о высоком уровне лаборатории — это значит, что вы имеете дело с крупным учреждением, которое может позволить себе дорогостоящее современное оборудование и материалы.

    P.S. «ИНВИТРО» — крупнейшая частная сеть лабораторий страны, проводит более 1000 видов исследований. Ежедневно ее пациентами становятся 24 000 человек. Результаты анализов признаются всеми медицинскими учреждениями России.

    Лицензия на осуществление медицинской деятельности ЛО-50-01-008046, 13.09.2016 г.

    www.kp.ru

    Качественная диагностика гепатитов

    Повышение в крови концентрации билирубина является следствием избыточного его образования или замедленного выведения из организма. При вирусных гепатитах нарушается выведение билирубина . Если концентрация билирубина в крови больше 30-35 мкмоль/л, появляется желтушное окрашивание слизистой полости рта, склер, а потом и кожи. У большинства больных гепатитом уровень билирубина не повышается. Некоторые заболевания печени, иногда и вирусные гепатиты, протекают с синдромом холестаза (нарушением отделения желчи или некоторых ее компонентов). В этом случае у больных может повышаться активность таких ферментов как щелочная фосфатаза ( ЩФ ) и гамма-глютамилтрансфераза ( ГГТ ), а также уровень холестерина и желчных кислот . Нужно иметь ввиду, что болезни печени не являются единственной причиной изменения активности и концентрации упомянутых ферментов или веществ.

    Синтетическую функцию печени отражает концентрация белка в крови,в первую очередь альбумина . При нарушении синтетической функции печени уменьшается концентрация в крови холестерина и мочевины. Нужно сказать, что все перечисленные симптомы поражения печени не специфичны для вирусного гепатита, но могут встречаться и при других заболеваниях печени (алкогольном, лекарственном гепатите и др.). Доказать, что выявленные при биохимическом исследовании крови изменения являются следствием вирусного гепатита можно лишь обнаружив в крови маркеры вирусных гепатитов.

    ИФА или иммуноферментный анализ — это лабораторный иммунологический метод качественного определения и количественного измерения антигенов, а также иммуноглобулинов и гормонов. Метод ИФА обладает высокой чувствительностью и специфичностью, которая в настоящее время составляет более 90%. Тест-системы для иммуноферментной диагностики выявляют широкий круг различных инфекций: ВИЧ-инфекция, вирусные гепатиты, цитомегаловирусная, герпесная, токсоплазменная и др. Метод иммуноферментного анализа (ИФА) дает возможность определения антител (IgG, IgA, IgM) к возбудителям инфекции в крови. Эти антитела вырабатываются организмом в ответ на инфицирование. Антитела выявляются при взаимодействии со специальными препаратами, содержащими соответствующие антигены, образующие с антителами прочный комплекс, который можно обнаружить разными способами. В основе метода лежит принцип взаимодействия иммуносорбента — антигена возбудителя инфекции с выявляемыми антителами. В зависимости от того, какие антитела использованы, тест-система будет выявлять в исследуемом образце или специфические антитела независимо от их класса, или антитела лишь определённого класса. Материалом для исследования служит сыворотка или плазма венозной крови, взятой натощак.

    Достоинства ИФА — возможность ранней диагностики инфекции, возможность прослеживать динамику развития процесса, быстрота и удобство в работе.

    Недостаток ИФА — относясь к непрямым методам диагностики, он позволяет определить иммунный ответ организма на возбудителя, а не сам возбудитель.

    ПЦР(качество,количество,генотипирование*) или полимеразная цепная реакция, является одним из современных методов получения данных при проведении медицинских анализов. Суть метода объясняется довольно просто. Существует множество заболеваний, о наличии которых человек может не подозревать долгое время. Традиционные анализы не всегда способны предоставить полную картину для вынесения корректного диагноза и назначения соответствующего лечения. Используя возможности ПЦР в медицинской диагностике, в организме можно найти микроорганизмы в минимальных концентрациях. ПЦР диагностика гепатитов. Гепатиты возникают по разным причинам (вирусные, токсичные гепатиты), имеют острую и хроническую форму. Соответственно, в каждом случае назначается разное лечение. К сегодняшнему дню известно 5 вирусов, вызывающих гепатит (А, В, С, D, Е). Каждый из них имеет свои этиологические особенности. В связи с этим бывает сложно установить вирус, вызвавший заболевание. Диагностика по методу ПЦР в этом случае является одним из методов исследования.

    Преимущества использования ПЦР в диагностике вирусных гепатитов: ПЦР позволяет проводить не только качественный анализ, то есть выявить наличие РНК ВГС, но и определить количество ее копий в 1 мл крови**, что особенно важно для назначения, мониторинга (оценка динамики вирусной нагрузки) и оценки эффективности применяемой терапии.

    * Порядок прохождения ПЦР диагностики:

    ** Вирусная нагрузка может быть высокой или низкой:

    Вирусная нагрузка считается высокой если результат ПЦР диагностики показывает более 800 000 МЕ/мл или 2 000 000 копий/мл

    Вирусная нагрузка считается низкой если результат ПЦР диагностики показывает менее 800 000 МЕ/мл или 2 000 000 копий/мл

    УЗИ органов брюшной полости (поджелудочная железа, печень, желчный пузырь, селезенка)

    УЗИ органов брюшной полости является одним из наиболее востребованных исследований. В сферу изучения при данном методе УЗИ попадают печень, желчный пузырь, поджелудочная железа, селезенка. Ультразвуковое исследование позволяет определить строение, плотность, размеры, в ряде случаев, функцию органов. Выявить органические изменения в органах, объемные образования, конкременты, нарушение кровотока. При исследовании желчного пузыря определяется его положение, структура и толщина его стенки, оценивается содержимое желчного пузыря (наличие камней, полипов, опухолей, иногда — консистенция желчи). В брюшной полости расположено много жизненно важных органов, в том числе кишечник, который занимает половину всей полости. Состояние кишечника, его наполнение и вздутие, может оказать существенную роль в качественном проведении исследования. Поэтому для создания оптимальных условий проведения качественного и достоверного УЗИ органов брюшной полости необходимой является предварительная подготовка.

    Как подготовиться к УЗИ брюшной полости:

    ! За 2-3 дня до обследования рекомендуется перейти на бесшлаковую диету, исключить из рациона продукты, усиливающие газообразование в кишечнике (сырые овощи, богатые растительной клетчаткой, цельное молоко, черный хлеб, бобовые, газированные напитки, а также высококолорийные кондитерские изделия — пирожные, торты);

    ! Пациентам, имеющим проблемы с ЖКТ (запоры) целесообразно в течение этого промежутка времени принимать ферментные препараты и энтеросорбенты (например, фестал, мезим-форте, активированный уголь или эспумизан по 1 таблетке 3 раза в день), которые помогут уменьшить проявления метеоризма;

    ! УЗИ органов брюшной полости необходимо проводить натощак, если исследование невозможно провести утром, допускается легкий завтрак;

    ! Если Вы принимаете лекарственные средства, предупредите об этом врача УЗИ;

    ! Нельзя проводить исследование после гастро- и колоноскопии, а также R-исследований органов.

    В Республике Казахстан обследование пациентов с социально значимым заболеванием вирусный гепатит В и/или С на аппарате ФИБРОСКАН входит в гарантированный объём бесплатной медицинской помощи.

    www.hepatit.kz

    Диагностика гепатита С

    Вирус гепатита С (HCV) — единственный вирус рода Hepadnovirus в семействе Flaviviridae, который имеет в своем составе цепочку рибонуклеиновой кислоты (РНК).

    Диагноз HCV инфекции можно заподозрить при повышенной активности печеночных ферментов в сочетании с факторами риска. Но, несмотря на это, особенностью заболевания является скрытая форма течения: на протяжении длительного периода у заболевшего могут не проявляться симптомы, указывающие на наличие вируса. Для выявления РНК HCV и, соответственно, подтверждения диагноза необходимо сделать ряд тестов, в том числе и анализ крови на гепатит, который покажет концентрацию вируса в крови. Однако у некоторых пациентов возможны отрицательные результаты исследований, поэтому следует провести повторное исследование как минимум через 6 месяцев.

    В настоящее время для обнаружения заболевания проводится лабораторная и клиническая диагностика гепатита С.

    Лабораторная диагностика гепатита

    Лабораторная диагностика основана на выявлении специфических маркеров инфицирования вирусом (РНК вируса гепатита С, анти -IgM/G).

    По результатам анализов назначаются дополнительные анализы на гепатит, после чего определяются с курсом лечения:

    при нормальных показателях биохимического спектра пациент находится под наблюдением лечащего врача в соответствии с медицинскими стандартами;

    при превышении двух норм показателей биохимического спектра сыворотки крови: АСТ, АЛТ, ЩФ и общего билирубина — проводят иммунно-ферментный анализ крови на анти-HCV;

    при положительном результате иммунно-ферментного анализа на гепатит, а также в случае выявления РНК вируса и определения генотипа и уровня виремии используется полимеразно-цепная реакция, цель которой заключается в подборе эффективной противовирусной терапии;

    при повышенных показателях печеночных проб, положительном результате иммунно-ферментного анализа и полимеразно-цепной реакции проводят клиническую диагностику, подбор противовирусной терапии и осуществляют контроль за эффективностью лечения гепатита С;

    при превышении нормы показателей печеночных проб и отрицательного результата иммунно-ферментного анализа и в случае превышения нормы в показателях печеночных проб, отрицательного результата полимеразно-цепной реакции и положительного результата иммунно-ферментного анализа проводят динамическое наблюдение за пациентом один раз в три месяца.

    Клиническая диагностика гепатита С

    Диагноз острого гепатита С ставится на основании клинических (увеличение печеночных проявлений – телеактоэктазии, печеночные ладони размеров печени и селезёнки), вирусологических (наличие в крови РНК вируса и/или антивируса), биохимических (повышенный уровень активности аминотрансфераз-АСТ и АЛТ) данных, имеющих четкую связь с парентеральными манипуляциями за первые месяцы до его развития: хирургическими операциями, переливанием крови, первой инъекцией наркотических средств и т.п.

    К сожалению, у большинства больных отсутствуют признаки острого гепатита, и обнаружение РНК вируса не позволяет отличить острый гепатит от хронического гепатита. В данном случае диагностика при гепатите С должна основываться на наличии соответствующих данных эпидемического анамнеза за 1-4 месяца до впервые выявленных признаков гепатита С, которыми являются антитела к вирусу гепатита С и уровнями ферментемии.

    К критериям для постановки диагноза хронический гепатит С относятся увеличение печени и селезенки, а также наличие гиперферментемии и антитела к вирусу гепатита С в крови в течение 6 месяцев. Точный характер поражения печени — стадию фиброза и степень некрозо-воспалительных изменений — позволяет определить биопсия печени, которая на сегодняшний день является наиболее точным и информативный метод диагностики хронического гепатита С. К тому же процедура проводится в течение нескольких секунд и абсолютно безопасна для пациента.

    Отметим, что наличие или отсутствие РНК вируса гепатита не является диагностическим критерием хронического гепатита С, а только определяет фазу процесса (активный, неактивный).

    Лабораторно-инструментальная диагностика хронических гепатитов в Европейском Медицинском Центре

    Лабораторно-инструментальная диагностика хронических гепатитов в Европейском медицинском центре проводится согласно стандартам диагностики. В перечень утвержденных исследований входят:

    УЗИ органов брюшной полости;

    анализ крови на гепатит;

    исследование уровня фракций билирубина в крови (АФП);

    исследование мочевины в крови;

    исследование уровня креатинина в крови;

    исследование уровня аминотрансферазы в крови (АСТ);

    исследование уровня аминотрансферазы в крови (АЛТ);

    исследование уровня гамма-глютамилтранспептидозы (ГГТП);

    исследование уровня щелочной фосфатазы в крови;

    исследование уровня калия в крови;

    исследование уровня натрия в крови;

    исследование уровня общих липидов в крови;

    исследование уровня альфа-фетопротеина в сыворотке крови;

    исследование уровня криоглобулинов в сыворотке крови;

    исследование антител к антигенам митохондрий;

    исследование антител к антигенам мышечной ткани;

    исследование антител к антигенам ядра клетки и ДНК;

    исследование кала на скрытую кровь;

    лапароскопия с осмотром печени и желчного пузыря;

    клинический анализ мочи;

    определение HВsAg Hepatitis B virus;

    определение антител класса M, G (IgM, IgG) к Hepatitis C virus;

    определение антител класса M,G (IgM, IgG) к Hepatitis D virus;

    определение антигена HВeAg Hepatitis B virus;

    определение антител класса M, G (IgM, IgG) к HbeAg Hepatitis B virus;

    определение антител класса M, G (IgM, IgG) к HВсAg Hepatitis B virus;

    ПЦР РНК качественный, количественный, генотип крови на Hepatitis C virus;

    ПЦР ДНК качественный, количественный, генотип крови на Hepatitis В virus;

    ПЦР РНК качественный, количественный, генотип крови на Hepatitis D virus;

    ПЦР РНК качественный крови на Hepatitis G virus;

    морфологическое исследование тканей печени;

    После того как сделаны все анализы на гепатит, и наличие вируса доказано, назначается лечение. Добавим, что эффективным считается лечение гепатита С, при котором не обнаруживается РНК вируса через 24 недели после прекращения приема лекарственных средств. При этом продолжительность курса лечения рассчитывается согласно показателю «вирусной нагрузки» — количества РНК вируса в крови.

    www.emcmos.ru

    Вирусы гепатитов. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов.

    Ретровирусы. Лабораторная диагностика, лечение, профилактика спиДа.

    Возбудитель гепатита A (HAV — Hepatitis A virus) относится к семейству пикорнавирусов, роду энтеровирусов. Вызывает наиболее распространенный вирусный гепатит, который имеет несколько исторических названий (инфекционный, эпидемический гепатит, болезнь Боткина и др.) В нашей стране около 70 % случаев вирусного гепатита вызывается вирусом гепатита А. Вирус гепатита А (ВГА, Hepatitis A virus) — возбудитель гепатита А человека, впервые идентифицирован С. Фейстоном и соавт. в 1973 г. В экскретах экспериментально зараженного добровольца.

    Структура и химический состав. По морфологии и структуре вирус гепатита А близок ко всем энтеровирусам. В РНК вируса гепатита А обнаружены нуклеотидные последовательности, общие с другими энтеровирусами.

    Таксономия. По современной классификации относится к роду Hepatovirus в составе семейства Picornaviridae, однако имеет ряд особенностей в структуре генома и биологических свойствах, которые отличают его от остальных членов этого семейства. К настоящему времени детально изучено почти 30 разных штаммов (изолятов) ВГА и более 100 изолятов обследовано на предмет генетического родства между ними. Как оказалось, основная генетическая детерминанта, контролирующая выработку вируснейтрализующих антител, присутствует в неизменном виде во всех обследованных изолятах. В то же время наибольшие генные различия в пределах 15 % от общей нуклеотидной последовательности регулярно обнаруживаются, главным образом, среди штаммов, имеющих различное географическое происхождение. Нa настоящий момент известно существование семи таких генных подтипов ВГА; штаммы, выделенные в России, принадлежат к подтипу IA.

    Морфологически ВГА представляет собой сферические частицы диаметром 27-30 нм, построенные по типу икосаэдрической симметрии и лишенные оболочки. Вирусный геном представлен линейной одноцепочечной РНК, состоящей из приблизительно 7500 нуклеотидных оснований, с общей молекулярной массой порядка 2,2 МДа. В нем определяются: (1) 5′ — нетранслируемая область; (2) единичная рамка считывания, кодирующая структурные и неструктурные белки и (3) короткая 3′ — нетранслируемая область, заканчивающаяся поли-А трактом. Геном ВГА имеет положительную полярность, то есть вирусная РНК непосредственно выполняет матричные функции; стратегия трансляции, очевидно, такая же, как и у других пикорнавирусов. Белковая оболочка (капсид) ВГА построена из множественных копий четырех (по некоторым данным, трех) структурных белков, обозначаемых как VP1, VP2, VP3 и VP4; их молекулярные массы, вычисленные по предсказанной аминокислотной последовательности, составляют соответственно 33,2; 24,8; 27,8 и около 2,5 кДа. Предполагают также наличие еще одного белка VP с мол. массой 2,4 кДа, который связан с 5′ — концом РНК и принимает участие в инициации трансляции.

    Зрелые, то есть содержащие полноразмерную РНК, вирионы ВГА имеют плавучую плотность в хлориде цезия, равную 1,32— 1,34 г/см3 и коэффициент седиментации в нейтральных растворах сахарозы порядка 156—160S. Кроме того в фекалиях больных и в препаратах из зараженных тканевых культур могут встречаться в небольших концентрациях частицы с иными значениями плавучей плотности (от 1,27 до 1,48 г/см3) и иными коэффициентами седиментации (50 и 90S). Они соответствуют т. н. дефектным вирионам, отличающимся от зрелых вирионов тем, что не содержат РНК или содержат только ее фрагменты, или же имеют повышенную проницаемость белковой оболочки.

    ВГА считается одним из наиболее устойчивых вирусов человека к факторам внешнего воздействия. При 60° С он полностью сохраняется в течение часа, и лишь частично инактивируется за 10—12 часов, однако кипячение приводит к разрушению вируса за несколько минут. ВГА остается инфекционным в течение по крайней мере одного месяца после высушивания на твердой поверхности в условиях обычного помещения (25° С и 42 % влажности). На выживаемости ВГА не сказывается реакция среды в пределах рН 3,0-10,0. Он устойчив к жирорастворителям, таким как эфир, хлороформ, фреон, генетрон и др. Эффективным методом стерилизации материалов, содержащих ВГА, является автоклавирование (12ГС 20 мин). Дезинфицирующие средства также достаточно эффективны: хлорамин в концентрации 2,0-2,5 мг/л полностью устраняет инфекционность ВГА за 15 мин перманганат калия (30 мг/л) — за 5 мин, 3 % формалин — за 5 мин (при 25 °C) йодистые соединения (3 мг/л) — за 5 мин; на поверхностях дезинфицирующий эффект может быть достигнут ультрафиолетовым облучением (197 microW/см2 в течение 4 мин). Следует учесть, что приведенные данные были получены в экспериментах с использованием очищенных взвесей вируса в солевых растворах; в материалах, содержащих органические вещества и плотные примеси, устойчивость ВГА значительно выше.

    Изоляты ВГА удается адаптировать к росту в клеточных культурах, хотя адаптация происходит на протяжении нескольких пассажей, каждый из которых может длиться до 6-8 недель. В основе этого процесса, очевидно, лежит отбор вариантов вируса, способных размножаться в данной культуре. Даже после хорошей адаптации ВГА удовлетворительная продукция вируса отмечается на 10—14 день, обычно она составляет ТКИД50 в 1 мл клеточного лизата. Как правило, размножение ВГА в культивируемых клетках не сопровождается цитолитическими или каким-либо другим повреждающим клетки действием. Известно очень немного вариантов ВГА, способных вызывать незначительный цитопатогенный эффект. При размножении существенная часть вирусного потомства остается в прочной связи с внутриклеточными мембранами. Синтез отдельных компонентов ВГА в инфицированных клетках и сборка вирионов изучены недостаточно, однако, есть основания полагать, что они в общих чертах подчинены тем же закономерностям, которые свойственны другим пикорнавирусам, например, полиовирусам. Размножение ВГА в клетках не подавляется такими известными ингибиторами пикорнавирусного роста, как гуанидин и НВВ (2-а-гидроксибензил-бензимидазол). По предварительным данным, на размножение ВГА могут угнетающе воздействовать рибавирин, амантадин, пиразофурин, соли цинка и некоторые другие химические соединения.

    Для обнаружения и количественного определения ВГА в разное время были предложены иммуноэлектронная микроскопия (с. 181) твердофазные радиоиммунный и иммуноферментный анализы; инфекционная активность ВГА может определяться титрованием на восприимчивых обезьянах, а для вариантов, адаптированных к культуре ткани, титрованием в соответствующей культуре по методу конечных разведении или методом бляшек. В последнее время для идентификации ВГА стали применяться ДНК-гибридизации и амплификации РНК в полимеразной цепной реакции.

    В экспериментальных условиях ВГА способен размножаться в организме приматов, воспроизводя те или иные черты гепатита. Наиболее адекватной лабораторной моделью инфекции, вызываемой ВГА, считается шимпанзе. Кроме того, к этой инфекции оказались восприимчивыми некоторые виды обезьян Нового Света: усатые, рыжеголовые и краснобрюхие тамарины, обыкновенные игрунки, а также совиные, или панамские ночные, обезьяны. Окончательно не решен вопрос о возможности заражения в эксперименте человеческим ВГА мартышкообразных обезьян Старого Света, хотя известно, что в естественных условиях эти обезьяны переносят гепатит, вызываемый вирусом, родственным ВГА.

    Критериями экспериментальной гепатитной А инфекции у обезьян служат:

    1. патологическое повышение уровней сывороточных ферментов АлАТ, АсАТ и ИЦД ;

    2. наличие характерных для острого гепатита изменений печеночной ткани;

    3. экскреция ВГА с фекалиями, иногда присутствие вируса в печени, желчи и сыворотке;

    4. появление антител к ВГА, в том числе в виде иммуноглобулинов класса М.

    Вирус гепатита А имеет один вирусспецифический антиген белковой природы. HAV отличается от энтеровирусов более высокой устойчивостью к действию физических и химических факторов. Он частично инактивируется при нагревании до 60°С в течение 1 ч, при 100 °С разрушается в течение 5 мин, чувствителен к действию формалина и УФ-излучению.

    studfiles.net

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *